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提rna用细胞沉淀吗
为什么trizol提不出来
rna
答:
注:组织或
细胞
量过少,可酌情减少Trizol用量;组织或细胞用量过多,会引起DNA对RNA的污染;高蛋白、脂肪或多糖类组织,肌肉组织或块状植物组织等,组织匀浆或液氮研磨后须4℃ 12,000g离心10min去掉不溶物,再进行下面操作,若顶层有脂肪物,则也须去掉;热天
提RNA
,带手套是必须的,手是RNase的主要...
trizol裂解
细胞
后可以按照
rna提取
试剂盒
提取吗
答:
总
RNA提取
试剂盒(TRIzol法)RIpure试剂是直接从
细胞
或组织中提取总RNA的试剂。它在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性。加入氯仿后离心,样品分成水样层和有机层。RNA存在于水样层中。收集上面的的水样层后,RNA可以通过异丙醇
沉淀
来还原。在除去水样层后,样品中的DNA和蛋白也能相继以沉淀的方式还原。...
提rna
时加完氯仿忘记静置会怎样
答:
忘记静置会不分层。
提RNA
时TRIzol使样品匀浆化,
细胞
裂解,溶解细胞内含物,同时因含有RNase抑制剂可保持RNA的完整性,在加入氯仿离心后,溶液分为水相和有机相,RNA在水相中,取出水相用异丙醇
沉淀
可回收RNA;用乙醇沉淀中间层可回收DNA;用异丙醇沉淀有机相可回收蛋白质。
污染的
细胞
能不能
提取RNA
答:
不能。从
细胞
中
提取RNA
比较难,需要精确的步骤进行提取,而且也容易失败,所以更不可以用污染的细胞进行提取。细胞(英文名:cell)并没有统一的定义,比较普遍的提法是:细胞是生物体基本的结构和功能单位。已知除病毒之外的所有生物均由细胞所组成,但病毒生命活动也必须在细胞中才能体现。
【求助/交流】
提取
真菌DNA或
RNA
一定要液氮研磨吗?
答:
用提核酸的方法,你用不用液氮,都是一起提出来。因为核心原理就是一样的:蛋白变性,有机试剂萃取,
沉淀
。而真菌和植物的
细胞
结构也有很大相似性。所以我认为应该先分开。顶你下,我也没做过。可不可以把真菌先弄到培养基培养下?真菌有筛选培养基吗?(没做过真菌,纯讨论学习)感觉提之前要分开。
rna
保护液可以提蛋白吗
答:
能迅速渗入新鲜组织
细胞
的胞浆迅速而强烈灭活生物样品中的
RNA
酶,抑制RNA降解。标本在4℃或室温长时间保存,其中的RNA不会降解,免去使用液氮或超低温冰箱的不便,从而有效地解决了样品保存及运输的问题。随后可采用当今世界上各种常见的RNA抽提试剂如RNAtrip、TRIzol或用户自备试剂
提取
样品RNA。
提取
总
RNA
时用Trizol裂解
细胞
,而不像提DNA那样用表面活性剂SDS、CTAB裂 ...
答:
TRIzol是一种新型总
RNA
抽提试剂,可以直接从
细胞
或组织中
提取
总RNA。其含有苯酚、异硫氰酸胍等物质,能迅速破碎细胞并抑制细胞释放出的核酸酶。TRIzol在破碎和溶解细胞时能保持RNA的完整性,因此对纯化DNA及标准化RNA的生产十分有用。CTAB为十六烷基三甲基溴化铵,CTAB提取缓冲液的经典配方 Tris-HCl (pH8....
用试剂盒
提细胞RNA
时需做什么准备
答:
Eppendorf管和“枪头”:RNase-free的管子和“枪头”(可以直接买到);或者普通的ep管和“枪头”,但是需要DEPC水浸泡后,高温灭菌(121度,20-40分钟)。如果需要使用研钵和药品匙,研钵和药品匙也是需要180度,8小时以上的烘烤。还需要没开封的手套,
提取RNA
时,尽量勤换手套,少说话,尽量不要对着...
组织研碎后Trizol一般裂解多长时间
答:
如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100%的去离子甲酰胺溶解。-70℃保存。RNA的提取注意事项1.从少量样品(1-10mg组织或102-104
细胞
)中
提取RNA
是可加入少许糖原以促进
RNA沉淀
。例如加800μl Typhon匀浆样品,离心取上清液后,异丙醇
沉淀RNA
前加5-10ug RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不...
加入trizol后可以超声裂解组织吗
答:
加入25-200μl无RNase的水或0.5%SDS(本公司均有售),用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解。如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100%的去离子甲酰胺溶解。-70℃保存。RNA的提取注意事项1.从少量样品(1-10mg组织或102-104
细胞
)中
提取RNA
是可加入少许糖原以促进
RNA沉淀
。例如加800μl Typhon...
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