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细菌提取总dna方法
细菌总DNA
怎样
提取
和鉴定
答:
细菌总DNA的提取
将菌株接种于液体LB培养基
,37℃震荡培养过夜.取1.5ml培养物12000rpm离心2min.沉淀物加入567 ul的TE缓冲液,反复吹打使之重新悬浮,加入30ul 10%SDS和15ul的蛋白酶K,混匀,于37℃温育1h.加入100ul 5mol/L NaCl, 充分混匀,再加入80ul CTAB/NaCl溶液,混匀后再65℃温育10min.加入...
细菌DNA的提取方法
有哪些
答:
SDS,轻轻混匀后50℃放置3h~5h,
接着用等体积的Tris饱和苯酚抽提2次,苯酚/氯仿/异戊醇抽提一次,氯仿抽提一次后,乙醇沉淀DNA
,用自动移液器 吸管 头将絮状DNA沉淀块吸附到Ep管中,70%乙醇洗2次,干燥后溶于适当1×TE或ddH2O中。3 1)细菌培养:细菌接种于5ml 液体培养基 中,37℃摇床(300rpm...
请教:
细菌DNA的提取
答:
一、水煮模板法——主要用于PCR反应 操作最简便
,对试剂条件要求低。缺点是纯度不够高,可能会含有RNA、蛋白等杂质。但是作为一般检测目的的PCR反应模板已经足够了。二、
CTAB/NaCl 法
CTAB/NaCl法提取的DNA纯度较高,蛋白杂质较少,保存时间长,编者更喜欢把终浓度为20μg/ml RnaseA加在第5步温育的时...
细菌总DNA
怎样
提取
和鉴定
答:
目前抽提DNA的方法多且比较完善,
常用方法有CTAB法小规模快速制备总DNA的方法
。小规模快速制备总DNA的基本原理是,在碱性条件下,用表面活性剂SDS将细菌细胞壁破裂,然后用高浓度的NaCl沉淀蛋白质等杂质,经过氯仿抽提进一步去掉蛋白质等杂质,经乙醇沉淀,得到较纯的总DNA。
细菌DNA提取
各步骤和目的,能详细的教一下吗
答:
。
凉得差不多再用少量TE溶解就得到DNA了
。当然,在蛋白酶K处理过后,也可以用1.4M NaCl沉淀一下蛋白(DNA在此浓度溶解度增加,而蛋白减小)。或者用酚:氯仿:异戊醇(25::24:1)PH>7.8抽提,去蛋白。其后依旧用异丙醇沉淀,70%乙醇洗。CTAB/NaCl功能与SDS相当,但一般用于提取植物基因组。
DNA提取试剂盒进行
细菌DNA提取
的实验
方法
答:
加入蛋白酶K,协同分解蛋白质,使DNA得以分离。加入丙酮或异丙醇,DNA会形成丝状结构,便于沉淀。用夹子取出DNA丝,进行乙醚/丙酮洗涤,去除杂质。最后,用TE缓冲液或纯净水溶解得到的DNA。实验成果与评估:经过上述步骤,实验成功
提取
出
细菌
的DNA,其透明液态形式符合标准。通过紫外分光光度计检测,
DNA的
...
怎样快速
提取细菌
的
DNA
答:
2、刮取1~2接种环菌苔加入150微升三蒸水中,混匀,100摄氏度煮沸10分钟。3、12000转/分钟离心10分钟,取上清,-20摄氏度保存备用。操作最简便,对试剂条件要求低。缺点是纯度不够高,可能会含有RNA、蛋白等杂质。但是作为一般检测目的的PCR反应模板已经足够了。有人称扩增4kb以下片段都可用此种
方法
...
如何
提取
细胞
总DNA
?
答:
碱裂解法通常有大量
提取
法和小量提取法,其提取原理是一样的,只需体积按一定比例扩大。纯化质粒
DNA
时通常还利用了质粒DNA相对较小及共价闭环两个性质。开始进行克隆时,对于小量制备的质粒DNA,经过苯酚、氯仿抽提。RNA酶消化和乙醇沉淀等简单步骤去除残余蛋白质和RNA,所得纯化的质粒DNA已可满足
细菌
转化...
细菌DNA的提取方法
有那几种?
答:
一般情况都是用煮沸法,但是有时候直接用
细菌
作为模板PCR。若你是要纯的基因组,你可以用蛋白酶K法,酚仿抽提,或者用试剂盒!
手工法 革兰阴性菌
总DNA提取
模板做PCR 经验
方法
答:
质粒的方法就溶液123的方法就可以了 DNA可以参考
提取
动物、植物
DNA的方法
更快速的方法可以参考我们做菌落pcr的方法,这个方法是采用少量的菌作为模板 然后加入pcr反应液,在pcr高温预变性的过程中菌细胞壁会裂解掉,dna和质粒都释放到溶液中作为模板参与扩增。如果你有96孔深板(1-2ml)以及排枪最好了,...
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