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细菌dna提取视频
怎样快速
提取细菌的DNA
答:
水煮模板法——主要用于PCR反应1、接种单菌落于LB或脑心平板,连续画线,37摄氏度培养18-24小时。2、刮取1~2接种环菌苔加入150微升三蒸水中,混匀,100摄氏度煮沸10分钟。3、12000转/分钟离心10分钟,取上清,-20摄氏度保存备用。操作最简便,对试剂条件要求低。缺点是纯度不够高,可能会含有RNA...
请教:
细菌DNA的提取
答:
二、CTAB/NaCl 法 CTAB/NaCl法
提取的DNA
纯度较高,蛋白杂质较少,保存时间长,编者更喜欢把终浓度为20μg/ml RnaseA加在第5步温育的时候,这样最后没有RnaseA污染。每一步操作细致一些,得到的DNA可用于Southern blot。注意:长时间保存DNA可放于-20℃,但要尽量减少反复冻融,否则影响DNA质量。三...
如何从细胞中
提取dna
答:
7、弃乙醇,敞开eppendorf管盖,烘干(37℃恒温箱)后,加1xTE溶液30ul,溶解DNA>12h以上,制成
的DNA
液-20℃冰箱保存备用。常用的外周血白细胞基因提取方法:试验原理: 苯酚/氯仿
提取DNA
是利用酚是蛋白质的变性剂,反复抽提,使蛋白质变性,SDS(十二烷基磺酸钠)将细胞膜裂解,在蛋白酶K、EDTA的存在下消化蛋白质或多肽...
细菌
总
DNA
怎样
提取
和鉴定?
答:
细菌
总
DNA的提取
1. 将菌株接种于液体LB培养基,37℃震荡培养过夜。 2. 取1.5ml培养物12000rpm离心2min。 3. 沉淀物加入567 ul的TE缓冲液,反复吹打使之重新悬浮,加入30ul 10%SDS和15ul的蛋白酶K,混匀,于37℃温育1h. 4. 加入100ul 5mol/L NaCl, 充分混匀,再加入80ul CTAB/NaCl溶液,...
dna的提取
方法
答:
dna的提取
方法:浓盐法、SDS法、CTAB法等。一、 浓盐法。1、根据DNA和RNA在电解溶液中的溶解度不同,可将二者分离。2、常用1 mol/L NaCl抽提,得到的DNP黏液中加入含有少量辛醇的氯仿一起摇荡,使之乳化,再离心,使蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间,而DNA则位于上层水相中。3、回收水相,用2倍...
细菌DNA的提取
方法有哪些
答:
1 快速微量
提取
法 A.取1.5ml 菌体 培养物 于一灭菌Ep管中,12000rpm离心1min,丢去上清夜,收集菌体。B.加入400ul裂解液(40mMTris-醋酸,20mM醋酸钠,1mMEDTA,1%SDS,pH7.8)混匀,置于37oC水浴1hr。C.然后加入200ul5mol/L的 氯化钠溶液 ,混匀后于13000rpm离心15min。D.取 上清液 ,用 ...
如何从粪便中
提取细菌DNA
答:
棉签沾取一点 然后放入液体培养基37℃摇菌过夜培养,取培养液涂平板 37℃过夜培养,从平板上筛选同种菌株的单一菌落 然后接着摇菌培养 再接着涂平板 一直筛选到平板上只有一种菌为止。然后挑菌摇菌 抽质粒 抽出来的就是
细菌的DNA
细菌DNA的提取
方法有那几种?
答:
一般情况都是用煮沸法,但是有时候直接用
细菌
作为模板PCR。若你是要纯的基因组,你可以用蛋白酶K法,酚仿抽提,或者用试剂盒!
盐析法
提取细菌dna
的步骤【在线等】
答:
盐析法只是用饱和氯化钠溶液代替有机溶剂沉淀蛋白质,获得
DNA的
过程。一般流程是采用常规手段裂解菌液后,按1/2体积比加入饱和氯化钠溶液,混匀,然后5000rpm离心,取上清即可。上清用2倍体积无水乙醇沉淀即可。
提取细菌基因组dna
除了CTAB/NaCl 法之外还有其他方法吗?谢谢!
答:
独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,然后
基因组DNA
在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。特点:1.离心吸附柱内硅基质膜...
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