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还可以用什么方法测蛋白质的等电点
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第1个回答 2014-10-05
●方法：平板等电聚焦
●原理：蛋白质分子在含有载体两性
电介质
形成的连续而稳定的线性pH梯度中进行电泳。但不自是按照
等电点
不同被分离。
●仪器：Bio-Rad Model 111Mini IEF Cell
●样品要求：
●液体：浓度>3mg/ml；体积>200ul；固体：质量>200ug
●样品纯度>90%；含盐量<3 0mM；分子量：一般要求大于1000Da
●常见影响测试情况:
1、蛋白质纯度不足
2、含盐量过高
3、蛋白质分子量太小，导致无法固定染色
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还可以用什么方法测蛋白质的等电点
答：
●方法：平板等电聚焦
●原理：蛋白质分子在含有载体两性电介质形成的连续而稳定的线性pH梯度中进行电泳。但不自是按照等电点不同被分离。●仪器：Bio-Rad Model 111Mini IEF Cell ●样品要求：●液体：浓度>3mg/ml；体积>200ul；固体：质量>200ug ●样品纯度>90%；含盐量<3 0mM；分子量：一般...
蛋白质等电点
测定
方法
答：
要测定蛋白质的等电点，
一种常用的方法是采用平板等电聚焦技术
。该方法基于蛋白质分子在特定环境下，如Bio-Rad Model 111Mini IEF Cell这种仪器中，能够在连续且稳定的线性pH梯度中进行电泳。在此过程中，蛋白质并不单纯按照等电点的不同进行分离，而是根据其电荷特性在pH梯度中移动。进行样品处理时，...
在
蛋白质等
电子测定过程中,如何根据实验现象判断酪
蛋白的等电点
?
答：
1）最小溶解度法
。蛋白质在不同pH溶液中形成不同的浊度来测定，即最大浊度处的pH值为蛋白质的等电点值。浑浊最严重时的pH值，即为酪蛋白的等电点。2）
等电聚焦法
。等电聚焦完成后，切成胶条，测量不同段的pH值，并用三氯醋酸显色，即可确定酪蛋白的等电点。
是不是所有的
蛋白质
都
能用沉淀法测等电点
答：
如果要测定准确的等电点，一般是不同pH条件下测量蛋白质的电泳迁移率，
然后用迁移率对pH作图，对应于迁移率为零的pH就是蛋白质的等电点
。按照蛋白质等电点不同而进行分离的电泳方法称为蛋白质等电聚焦电泳。由于其分辨率可达到0.01pH单位，故特别适用于分离分子量相近而等电点不同的蛋白质组分。
测量蛋白质等电点
的
方法
有
哪些
?谢谢
答：
测定等电点的
方法
是在不同pH条件下
测量蛋白质的
电泳迁移率，然后用迁移率对pH作图，对应于迁移率为零的pH就是
蛋白质的等电点
。按照蛋白质等电点不同而进行分离的电泳方法称为蛋白质等电聚焦电泳。由于其分辨率可达到0.01pH单位，故特别适用于分离分子量相近而等电点不同的蛋白质组分。
解释如何
蛋白质等电点
的测定
答：
近年来
蛋白质的等电点可以采用
等电聚焦技术加以准确测定，但需一定的实验条件。本实验采用蛋白质在不同pH溶液中形成的混浊度来确定，即混浊度最大时的pH值即为该种蛋白质的等电点值，这个
方法
虽然不很准确，但在一般实验条件下都能进行，操作也简便。四、操作步骤：1．制备蛋白质胶液 （1）称取酪...
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