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提rna需要多少细胞
Trizol法提
RNA 需要
最少的
细胞
量是
多少
答:
加入1ml的75%乙醇,上下颠倒混匀后冰上放置5min,12000rpm,4℃离心5min。弃上清,待残余乙醇挥发殆尽后,沉淀重悬于20μl用DEPC处理水中,存于-70℃。用分光光度计测OD260/280nm波长的吸光值鉴定
RNA
浓度,以琼脂糖凝胶电泳证实其完整性。 10-5
细胞
数,
提取
的浓度一般检测为500-1000ug/mL(转...
24孔板
提RNA
可以提多高的浓度
答:
24孔板
提RNA
可以提20ng/ul以上的浓度即可。用Trizol来
提取细胞
总RNA的话,一个6孔板的细胞足够了。对于贴壁培养的细胞,可将培养基吸出后直接向培养板中加入Trizol来溶解细胞,然后分次移出细胞裂解物进行后续操作即可。值得注意的是,对于所加Trizol的量,是依据培养板的面积而不是依据细胞的数量来决定...
细胞
有死亡,对于
提取RNA
有影响吗
答:
用Trizol来
提取细胞
总
RNA
的话,一个6孔板的细胞足够了。对于贴壁培养的细胞,可将培养基吸出后直接向培养板中加入Trizol来溶解细胞,然后分次移出细胞裂解物进行后续操作即可。值得注意的是,对于所加Trizol的量,是依据培养板的面积而不是依据细胞的数量来决定用量的(一般每10cm2加1 ml)。当Trizol量...
怀疑死亡的细胞拿出来还能
提RNA
吗 与活
细胞提取
有什么区别?
答:
用trizol来
提取细胞
总
rna
的话,一个6孔板的细胞足够了。对于贴壁培养的细胞,可将培养基吸出后直接向培养板中加入trizol来溶解细胞,然后分次移出细胞裂解物进行后续操作即可。值得注意的是,对于所加trizol的量,是依据培养板的面积而不是依据细胞的数量来决定用量的(一般每10cm2加1 ml)。当trizol量...
怀疑死亡的细胞拿出来还能
提RNA
吗 与活
细胞提取
有什么区别?
答:
用trizol来
提取细胞
总
rna
的话,一个6孔板的细胞足够了。对于贴壁培养的细胞,可将培养基吸出后直接向培养板中加入trizol来溶解细胞,然后分次移出细胞裂解物进行后续操作即可。值得注意的是,对于所加trizol的量,是依据培养板的面积而不是依据细胞的数量来决定用量的(一般每10cm2加1 ml)。当trizol量...
怎样除去
RNA
中的基因组DNA污染
答:
RNA提取
步骤:1. 匀浆处理:① 组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10%。② 单层培养
细胞
直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定...
如何从血清中
提取RNA
答:
像以上全血的
RNA提取
有两种思路:1)直接处理抗凝的全血,即加入如Trizol的裂解液直接往下做。此方法有个缺点:处理的体积血液体积有限,一般1ml Trizol处理100ul血液,最多不超过200ul.2) 先去除血液中的红
细胞
分离出其中的白细胞(即淋巴细胞),然后提取白细胞的RNA。此方法的缺点:只能提取得到淋巴...
100mg脂肪组织能够
提取多少
dna
答:
RNA提取
步骤:1. 匀浆处理:① 组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10%。② 单层培养
细胞
直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定...
求助:提低等动物血液
RNA
的方法
答:
像以上全血的
RNA提取
有两种思路:1)直接处理抗凝的全血,即加入如Trizol的裂解液直接往下做。此方法有个缺点:处理的体积血液体积有限,一般1ml Trizol处理100ul血液,最多不超过200ul.2) 先去除血液中的红
细胞
分离出其中的白细胞(即淋巴细胞),然后提取白细胞的RNA。此方法的缺点:只能提取得到淋巴...
怎样
提取细胞
核内的
RNA
答:
离心后沉淀加入1 ml裂解液混匀。将处理后的样品在室温放置5分钟,使得核酸蛋白复合物完全分离。向匀浆样品中加0.2ml氯仿,盖好管盖,剧烈振荡15秒,室温放置3-5分钟。2-8℃ 12000 rpm离心10分钟。
RNA
主要在上层无色的水相中,把水相转移到新管中,不要吸到沉淀。
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