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    • 如何纯化PCR产物？为什么总是不纯

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    推荐答案   2017-05-19
    你说的是PCR产物的纯化吧？
    先用溶液溶解含DNA的琼脂糖凝胶，然后加入有吸附柱的离心管中
    吸附柱吸附DNA
    离心，将含琼脂糖的溶液去除；
    接下来加入去盐的漂洗液进一步去除杂质；因PH值的原因，DNA还是吸附在吸附柱上的膜上；
    最后加入纯水或者TE溶解液，在这个条件下DNA会溶解在其中，通过离心将液体离下来，得到的液体就是纯化好的PCR产物了
    温馨提示：答案为网友推荐，仅供参考
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    DNA纯化——PCR产物纯化答：结论</PCR产物纯化至关重要，因为反应体系中的离子、dNTP、引物及聚合酶等杂质可能干扰后续实验。因此，选择适合的纯化方法，如硅胶层析柱法的高效，磁珠法的便捷，还是凝胶回收的精细，都应根据实验需求和结果进行权衡。确保每个步骤的精确执行，为后续科研实验提供纯净的DNA样本。
    PCR产物用什么方法纯化答：如果特异性扩增比较多，那么就割胶纯化。如果没有特异性扩增，只是除去杂质，那么PCR产物纯化试剂盒纯化一下。
    请教PCR产物测序前的纯化答：使用普通的产物纯化试剂盒纯化即可，只不过对回收产物的纯度和浓度要求都稍高。纯度越高，浓度越大，测序成功的可能性就越大。
    如何纯化pcr产物或粗提的dna答：DNA纯化的步骤是：1.2-25倍100%的酒精冰箱中先预冷，降温后再加入DNA中；2.低温，冰中反应5min至更长时间；3.低温，离心；4.加70%乙醇清洗两遍；5.加TE溶解DNA.
    简述进行产物的纯化有哪些方法,它们的纯化机理分别是什么答：那要看你的PCR产物有没有非特异性带，如果你PCR产物跑胶后很纯的只有一条带（不算引物二聚体），那么就不需要切胶纯化，传统法就是将PCR产物加入2倍体积的乙醇－20度沉淀过夜后低速短暂离心（如 3000rpm离心1~2min)，弃掉上清，然后用70%乙醇洗涤一次后，弃掉乙醇，放干后再用无菌水或者TE溶解。
    用于与载体连接的pcr酶切产物是如何纯化的答：如 3000rpm离心1~2min)，弃掉上清，然后用70%乙醇洗涤一次后，弃掉乙醇，放干后再用无菌水或者TE溶解。当然这种方法对PCR产物纯化后回收率是很低的，你需要多做几管PCR，然后一起纯化回收。但是现在实验室一般都是用PCR产物纯化试剂盒，回收纯化的效果要好得多。
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