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蓝白斑筛选中可能出现的结果有哪几种,简要说明出现的原因
如题所述
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推荐答案 2017-05-11
在进行
蓝白斑筛选
的时候,出现了两个奇怪现象:
一、我的空白载体转的大肠杆菌不但出现了蓝斑而且还有白斑。
二、连有目的基因的载体转的大肠杆菌出现了好多蓝色小点点,看起来不像是细菌。
不知道是什么原因,我的大肠杆菌是做过氨苄对照测试的,应该没有杂菌的。
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蓝白斑筛选
答:
蓝白斑筛选
是一种基因工程常用的重组菌筛选方法。野生型大肠杆菌
产生的
β-半乳糖苷酶可以将无色化合物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)切割成半乳糖和深蓝色的物质5-溴-4-靛蓝。有色物质可以使整个培养菌落产生颜色变化,而颜色变化是鉴定和筛选的最直观有效的方法。设计适用于蓝白斑筛选...
蓝白斑筛选
实验
,结果
都是
白斑说明
所有的细胞都插入基因成功了吗?_百 ...
答:
我觉得你更可能是培养基出问题了或者其他的 蓝白斑筛选不可能所有的都是白斑的
,连接效率没有那么高 建议你再检查下自己的实验
蓝白斑筛选的
原理是什么?
答:
蓝白斑筛选
是一种基因工程常用的细菌重组子的筛选方法。野生型大肠杆菌(E.Coli)
产生的
β-半乳糖苷酶可以将无色化合物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)切割成半乳糖和深蓝色的物质5-溴-4-靛蓝。5-溴-4-靛蓝可使整个菌落产生蓝色变化。在经人工插入外源基因后,突变型大肠杆菌的β半...
蓝白斑筛选的蓝白斑筛选
原理
答:
但它们同时存在时。α片段与ω片段可通过α-互补形成具有酶活性的β-半乳糖苷酶。这样,lacZ基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补。而当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地破坏α片段的编码,使得带有重组质粒的LacZ-细菌形成白色菌落。
蓝白斑筛选的
原理是什么?
答:
由α-互补而
产生的
LacZ+细菌在诱导剂IPTG(异丙基硫代半乳糖苷)的作用下,在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落。而当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地破坏α片段的编码,使得带有重组质粒的LacZ-细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选,称为
蓝白斑筛选
。
蓝白斑筛选
问题!!
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