你好,我在网上查关于蓝白斑实验的相关内容的时候,发现很多人问为什么没有出现蓝斑,是不是这个实验蓝斑也有一定作用?可是如果说培养基没有问题的话,是不是蓝斑越少越好?
追答个人做实验的经验所得,也不一定可靠哈:
我们在通常的载体连接实验中,能够长出几十个克隆已经很不错了。但做蓝白斑筛选的时候经常能够长出大量的克隆,这跟载体的连接效率有关,毕竟就一个T-A的连接,也正因为就一个碱基的连接,因此很可能出现阴性结果长出蓝斑。所以个人觉得你整版都是白斑没有蓝斑,几乎是不可能的,长出的蓝斑也可以用来检查你的培养基有没有问题。我更倾向于你的X-gal什么的出问题了,你可以挑些菌落做菌液pcr试试。蓝斑的存在的话个人感觉无所谓,只要在蓝斑出现的情况下,你白斑越多越好了