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提取细菌基因组dna
请教:
细菌基因组DNA提取
答:
细菌基因组DNA的提取
方法综述,提供了五种方法。一、快速微量提取法 A.取1.5ml菌体培养物于一灭菌Ep管中,12000rpm离心1min, 丢去上清夜,收集菌体。B.加入400ul裂解液(40mMTris-醋酸,20mM醋酸钠,1mMEDTA,1%SDS,pH7.8)混匀,置于37oC水浴1hr。C.然后加入200ul5mol/L的氯化钠溶液,混匀后...
请教:
细菌DNA的提取
答:
CTAB/NaCl法
提取
的
DNA
纯度较高,蛋白杂质较少,保存时间长,编者更喜欢把终浓度为20μg/ml RnaseA加在第5步温育的时候,这样最后没有RnaseA污染。每一步操作细致一些,得到的DNA可用于Southern blot。注意:长时间保存DNA可放于-20℃,但要尽量减少反复冻融,否则影响DNA质量。三、盐析法 介于方法一...
提取细菌基因组dna
除了CTAB/NaCl 法之外还有其他方法吗?谢谢!
答:
有,用试剂盒。独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,然后
基因组DNA
在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除, 最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱。特点:1.离心...
提取细菌DNA
检测到有条带,PCR后无条带;而
基因组DNA
检测到无条带的,P...
答:
可能
细菌
DNA浓度太高,影响PCR扩增,可以将模板稀释,然后扩增;
基因组DNA的
条带电泳是没有,可能是浓度较低,检测不到,但是达到了扩增的模板要求,所以可以扩增出条带,另一个可能是PCR过程中的试剂包括水有污染,所以出现阳性结果。
DNA提取试剂盒进行
细菌DNA提取
的实验方法
答:
探索
细菌基因组
:DNA提取试剂盒的详细实验指南 实验目的:本研究旨在通过
细菌DNA提取
试剂盒,深入了解细菌的遗传特性,为后续的基因组分析和生物技术应用提供关键的生物材料。实验原理揭秘:DNA提取是一项精细的生物化学操作,通过一系列步骤,如细胞破碎、酶解、蛋白质沉淀和纯化,将细菌细胞内的遗传信息分离并...
细菌DNA提取
各步骤和目的,能详细的教一下吗
答:
。凉得差不多再用少量TE溶解就得到
DNA
了。当然,在蛋白酶K处理过后,也可以用1.4M NaCl沉淀一下蛋白(DNA在此浓度溶解度增加,而蛋白减小)。或者用酚:氯仿:异戊醇(25::24:1)PH>7.8抽提,去蛋白。其后依旧用异丙醇沉淀,70%乙醇洗。CTAB/NaCl功能与SDS相当,但一般用于
提取
植物
基因组
。
细菌基因组
的
提取
步骤
答:
细菌基因组
的
提取
可以使用专门的试剂盒,原理很简单,首先通过离心的方法获得细菌沉淀,然后使用缓冲液重悬细菌,再加入裂解液将菌体裂解,然后加入RNA酶和蛋白酶,来降解里面的RNA以及蛋白质,随后再使用柱回收的方法,将
基因组DNA
纯化。
不经过PCR扩增能否
提取
到
细菌
的
DNA
答:
提
细菌基因组DNA
不需PCR,摇菌,提就是。若需检测,一般情况下,提完dna后,电泳检测即可,细菌基因组DNA虽是环状,但大致的大小和特征还是很明显的,同时也可看到是否有质粒或rna污染。若要进一步检测是否是目标细菌,PCR也可以,但你需要订引物啥的,更简单的办法是做限制酶切图,比如常用又便宜的...
试剂盒可以用来
提取
结核分枝杆菌
基因组DNA
吗
答:
试剂盒可以用来
提取
结核分枝杆菌
基因组DNA
使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。 所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。1、取
细菌
培养液1ml,12000rpm离心1min.,尽量吸除上清。2、向菌体中加入200ul溶液A,振荡或用移液器吹打使菌体充分悬浮(如果是革兰氏阳性菌...
细菌基因组DNA的提取
法(CTAB/NaCl 法),提取的DNA是否为细菌总DNA? 非常...
答:
这个方法提取的的确是总DNA。如果PCR对质粒敏感度低 可能跟你的质粒是低拷贝有关(严谨型质粒)。你可以在
提取DNA
之前添加氯霉素 以富集 质粒数量,之后再提取总DNA。 试试看吧
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