红曲米的制作 生物技术 081 第十小组 田细 汤洪海 潘神恩 朱守殿 二实验原理 红曲霉具有喜湿和耐温 耐酸特性 大米蒸熟成米饭后接种红曲霉菌种在置于30~40 度pH 值约为 6.6 条件下真菌互相扩散、传布、发酵、繁殖红曲霉分泌红色素终此发酵后采用日光晒干后或低温真空干燥成只紫红色-棕红色大米粒。菌丝初呈白微色成熟期为棕红色溶于水为鲜红色。在制曲过程第四天开始生成色素从第八天开始急剧增加红曲米经干燥并粉碎成粉状红曲制品 在我国红曲米生产与应用有历史悠久它不仅被广泛应用于酿酒、食用色素、红曲醋类随着健康与保健品的流行红曲在医药方面也有被广泛应用红曲对循环系统和消化系统都具好良好功能尤其是红曲含有多种活性物质具有抗菌。抑菌、防治心血管疾病等药物因此对于食品工业来说红曲生产具有非常重要的价值。 三实验材料及器材 糯米、红曲霉、简易平台、小型蒸锅、暖气保温箱、三角瓶 48 个试管 3 个平面培养皿 5 个等。 四实验流程 选择糯米-洗浸-蒸熟-冷却- 接种 -温箱发酵-烘干-指标检测 五培养基的制备 斜面培养基PDA 培养基由马铃薯 20g(去皮切片煮沸 30 分钟过滤去渣):
葡萄糖2g 琼脂 1.5g 蒸馏水 100ml ph5。 种子培养基 硝酸钠 0.2g 磷酸氢二钾 0.1g
氯化钾 0.05g 硫酸镁 0.05g 硫酸亚铁 0.001g琼脂 2g水 100ml。 五实验操作 1曲种制备 a活化菌种将红曲霉菌种接种到斜面培养基上培养。 30 度7 天 b种子培养 用适量无菌水洗下斜面孢子转入带有玻璃珠的小三角瓶中充分打撒制成孢子悬液。取 200ml 孢子悬液涂布于种子培养基上30 度培养 48 小时。之后用无菌蒸馏水洗下种子液摇匀记下总体积 V。 2选择优质大米去渣。放入三角瓶加入冷水泡 24 小时米水质量比 1:1.5 1;2 , 1:2.5 1:3每比例做 12 个,之后放入高压灭菌锅灭菌温度 121 度时间 25 分 3接种把灭好菌的三角瓶冷却之 30 度左右用制好的种子液以不同的比例 5%10%15%20%(种子液的体积相对发酵液体积的%数)接种到三角瓶里的糯米中发酵此操作在无菌台上完成接种采用无菌玻棒搅拌使其混匀初始 ph 分别为 4 5 6 4发酵把三角瓶放入 30 度恒温箱发酵 10 天之后改用 25 度 10 天。自然光照。 5.烘干放在小于 60 度温度下烘干成粒即为成品。 六实验结果质量检查 1色价测定 称取红曲米样品 05009放人带刻度的 100mL 具磨口塞试管中加入 70酒精至 50mL摇匀后放人 60℃的水浴保温萃取 2h取出冷却(必要时补充定容)用普通定性滤纸过滤人具塞试管或三角瓶中约滤出 lOmL 左右即可。吸取滤液 1ml 放人25mL 刻度试管或容量瓶中加入 70的酒精稀释定容至 25mL。用 lcm 比色皿以 70的酒精作空白在分光光度计上取波长 505nm测定样品萃取稀释液的吸光度将测得的样品平均吸光度乘以 2500(稀释倍数)即作为红曲米的色价。 2.红曲米桔霉素的测定; 标准曲线的绘制吸取质量浓度为 2、4、8、16 和 24 IJ,gmL 的桔霉素标准溶液 10 灿分别进样 按 2 1 建立的色谱分析方法测定桔霉素含量 以峰面积积分值为纵坐标桔霉素浓度为横坐标绘制标准曲线计算得回归方程为Y=16 296X+5 6924(R2=0997 3) 红曲米用甲苯一
乙酸乙酯一甲酸(73l∥∥)提取超声波处理时间 10 h提取温度 50℃。准确吸取 10 止红曲米样品液在 21 建立的色谱分析条件下进行检测重复测定 5 次计算平均值。 3.红曲米 monacoling 测定 采用乙酸乙酯为提取剂以
正己烷乙酸乙酯无水乙醚甲酸(201505)为第 1 展开剂以正己烷
氯仿无水乙醚(3015)为第 2 展开剂红曲产品提取液的Monacolin K 能很好地分离和检测。
红曲的制作方法 红曲是我国古代人民利用微生物加工食品的一大发明。富含酒香，不仅是酿酒 的好原料，也是良好的调味品及色素。同时它又具有和胃、健脾、消食、祛肿的功 效，因而，在国内外市场上很受欢迎。著名的福建老酒、北京同仁堂药酒、浙江绍 兴豆腐乳等，均采用红曲作主要原料。 红曲的工艺，主要掌握五个环节: 一、生产红曲:必须选用优质大米。一般大米必须经过再一次的碾白工序排 除米糠、碎米及、谷皮、杂质，直到纯度100%，选好料后，把它放进水池流水浸 泡24-36 小时，水比大米高出30 厘米，使它吸收水分。然后取出，置于蒸床内蒸 熟，时间掌握5-10 分钟，气压4.5 公斤的1 吨锅炉，温度150℃，蒸后倒出成 堆。然后再进行第二次复蒸(时间约为5-10 分钟)，使大米蒸至透心时取出，铺 摊于竹箩上，冷却至20℃上下备用。 二、配方拌料:经过蒸熟冷却后的大米，拌同醋糟辅料配制红曲霉培养基。 其配方有二种: (1)大米100 斤，老醋3 斤(要求3 年以上的陈醋)土曲糟5 斤。 (2)大米100 斤，红曲7 斤，米饭5 斤，老醋5 斤。 (3)组配方把老醋、土曲糟拌进蒸熟的大米搅拌均匀，达到米饭通红为 止。(2)组配方则先把红曲磨成粉末，米饭煮至如稀饭一样稠粘后，把初曲及醋 拌进，然后调到蒸熟的大米中去，反复搅拌直至通红。如用搅拌机，每小时可拌4 千斤。 三、室内发酵: 红曲主要依靠红曲霉菌的繁殖与生长，它所适宜的温度为40-45℃。发酵 室必须洁净无味，室内宜用粘土与砂质土壤合成的地面。这种地面容易干燥，每隔 一年半后还要进行一次更新，以利交赤散于室内地坪。打开通风窗15 分钟后第二 次发酵时，再把它集中成山形，加麻袋覆盖，密封6 小时，堆温以35℃为宜。然 后又铺散于地面，室温不宜低于20℃，保持闵12 小时后，开窗通风，并翻动一 次，使其均匀。再经12 小时后又进行一次翻动，继之每隔8 小时翻动一次，目的 是使底、面均匀。若室温不足可用电热或炭火加温。 夏天气温高时注意通风或以其他设备降温。 各个曲种的发酵期有所不同。若是制库曲，在室内应发酵9 天，每10 斤大 米可制成4.5-5 斤重量的红曲;若是制色曲，室内要多发酵5 天，使红曲霉蔓延 至内部，以内外呈通红无斑点为度，每10 斤大米，只能制出2.5-3 斤曲量;若是 制轻曲，只要多发酵2 天，室温保持40℃使全部米心发酵通红，每10 斤大米制 3-4 斤曲量。 四、加温发酵: 为使红霉菌加快繁殖，红曲在发酵过程需要加温，促进发酵。因此，在发酵 4 天后，用麻袋将曲种装好，放入水池，使其吸足水分后提起(约20 分钟)，再 回到发酵室内堆成山形，密封2 天，室内温度不得低于30℃。然后摊开铺散于地 面，打开通风窗，并喷洒清水。每100 斤大米，喷清水40-50 斤，用喷壶喷洒均 匀。以后每隔一天翻动一次，使上下温差平衡，发酵均匀，直到出房为止。 五、出房曝晒: 红曲从大米至发酵结束，全流程只需9-14 天时间，发酵好的红曲及时提出 铺于竹席上，置于列日下曝晒。晒曲时间，春、秋、冬各12 小时，夏天7 小时， 晒曲时要翻动5 次，使其干度均匀。若红曲出房期正逢阴雨天，必须把红曲摊铺于 通风地板上晾干。 红曲成品表面红中含青，用手指捻，可成红粉末，色泽艳丽。成品用袋包装 后，应置于密封仓内保管，防止受潮。若贮藏时间过长，发现生虫，必须及时翻 晒，用烈日强光驱杀，切不可用药物毒杀。 发酵法制红曲米 红曲米是以大米为原料经微生物发酵制成的天然色素食品物料，色泽紫红。 用其制成的食品色味俱佳。红曲米富含糖化酶、淀粉酶、红曲霉红素、红曲霉黄 素、有机酸等物，被广泛用于罐头、果酱、糕点、糖果、腐乳、酿酒、饮料、红 肠、火腿等食品行业。近年风靡日本、
东南亚等地区，市场前景十分看好。其制备 方法如下: 一.蒸米将优质大米淘洗干净，用清水浸泡60 分钟左右，过滤，甩干，移入 蒸笼中，用旺火烧至见有大量蒸汽时，即停止加火出笼。此时，米已蒸至半熟。 将半熟米倒入木桶中(不得用铁质器具)入少许凉水，并不停地上下翻搅，使其冷 却，待温度降至20℃左右时，复入蒸笼用大火蒸，蒸至冒浓汽后，再蒸15~20 分 钟，然后停火让其自然冷却，见无蒸汽冒时方可开笼出锅。 二、发酵将熟料倒入洁净木桶内，稍翻搅。当温度降至55~58℃时，将磨 成粉状的“六二酒曲”撒入熟料中，搅拌均匀(配比量0.4%~0.6%)置于洁净的篾 垫上，上覆清洁白布，周围用棉絮紧裹，保温55℃左右进行发酵。24 小进后(冬 季需40 小时)，当物料升温至60℃时，将发酵料置于洁净水泥或瓷板上，用铁铲 翻动，使之降温。当用手触摸索不烫手时，再将物料堆积并拍紧，盖上清洁白布， 上再用麻袋盖好。24 小时后，再将物料摊开，此时物料已呈淡红。散温后，再次 堆积。加盖麻袋，继续发酵。18 小时后将发酵料移入洁净箩筐，连筐放入盛有 15℃清水的陶瓷容器中，水深至刚浸没物料。30 分钟后，取出箩筐，将物料置于 瓷板上，再堆积12 小时，至物料呈现深红色时即表示发酵结束。 三、干燥 将发酵好的物料转置通风处摊开，自然晾干，再入烘房干燥成粒 状，即为成品。
追问感谢你，红曲米是需要菌种来发酵的，依你所说，醋糟辅料，老醋，土曲糟，还有红曲等就是菌种，那么是哪种菌种自己制作更方便稳定，更具操作性，谢谢你！本人主要想知道菌种的详细制作。