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我做western时从细胞中提取我要的目的蛋白，用的是RIPA蛋白裂解液，裂解后样品特别粘稠，这样算裂解成功么
如题所述
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推荐答案 2011-07-31
特别粘稠是DNA从核膜破裂出来的结果，只要裂解后溶液澄清就裂解完了
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http://66.wendadaohang.com/zd/nv2iDiDn9.html
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加了
蛋白裂解液,
为啥更多了
答：
蛋白浓度过低。加了
蛋白裂解液
,更多了是因为蛋白浓度过低。蛋白裂解液是一种传统的
细胞
组织快速裂解液。
RIPA裂解液裂解
得到的
蛋白样品
可以用于常规的Western、IP等。
细胞提取蛋白
可以
用RIPA裂解后
放冰箱吗
答：
尽量-20度下冻存。
蛋白
和RNA都可以短期再-20度下冻存，如果长期的话，RNA要保存再-80度冻存，你也可以蛋白里面加
RIPA裂解液
冻存，RNA里面加trizol保存。都不建议放太长时间，放置太长时间是会影响效果的，也可以使用BIODAI的保存液保存，这样效果会好点。
western
blot实验步骤
答：
在
RIPA蛋白裂解液
中加入蛋白酶抑制剂、磷酸化蛋白酶抑制剂（根据说明书确定加入量）2.研磨: 提前在离心管中分装300μL RIPA蛋白裂解液并放入2颗研磨珠，称取100mg左右
样品，
置于匀浆机中充分研磨;3. 蛋白裂解: 将样品置于冰上裂解2h, 期间于涡旋振荡器上震荡2-3次;4. 蛋白收集: 将
裂解后
...
做好
western
blot需要注意各种细节,转给需要的你!
答：
做好
Western
需要注意各种细节。工欲善其事,必先利其器,首先还是
从蛋白提取
开始谈起。 1.收样前3min先配制
细胞裂解液
(现配现用)
,RIPA
:蛋白酶抑制剂:磷酸酶抑制剂=99:1:1。6孔板收集蛋白每孔需200ul,计算用量。以收集六孔蛋白为例,按比例加入RIPA 1200ul
,蛋白
酶抑制剂12ul,磷酸酶抑制剂12ul,混匀后置于冰上...
有了
ripa裂解液
怎么
提取蛋白
答：
加到细胞培养皿里面 摇15分钟 然后刮下来吸出来 是
做western的
话加Loading buffer 再95°煮10分钟就OK啦
细胞
核
裂解液
有什么作用
答：
1.
RIPA裂解液
在细胞实验中用于提取核
蛋白，
其对
蛋白质的提取
效果较好。2. 将RIPA裂解液加入到细胞培养皿中，并与细胞混合摇动15分钟，之后可以刮取或吸出细胞内容物。3. 若进行
Western
blot实验，需在裂解液中加入Loading buffer，然后将混合物在95°C下煮沸10分钟，以充分变性蛋白质。
裂解液的裂解
...
大家正在搜
western细胞蛋白提取
做western用多少个细胞
细胞冻存后western
western用标准蛋白造假
western蛋白上样量一般多少
细胞蛋白质提取
细胞总蛋白提取
细胞总蛋白提取步骤
死细胞可以提取蛋白吗
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