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细胞总蛋白提取
为什么
提取细胞蛋白
浓度总是很低
答:
细胞总蛋白提取
量少原因很多 比如可能是该细胞状态不好,造成表达量偏低,提取后蛋白总量就会少 蛋白与蛋白间性质差异大,因为所需的细胞提取液不一样,会造成一些蛋白不能溶解于提取液中而和细胞碎片一起沉淀掉 不同的提取方法不一样,可能造成部分蛋白沉淀,影响到提取总量 蛋白质溶液应该是澄清的,可...
为什么
提取细胞蛋白
浓度总是很低
答:
细胞总蛋白提取
量少原因很多 比如可能是该细胞状态不好,造成表达量偏低,提取后蛋白总量就会少 蛋白与蛋白间性质差异大,因为所需的细胞提取液不一样,会造成一些蛋白不能溶解于提取液中而和细胞碎片一起沉淀掉 不同的提取方法不一样,可能造成部分蛋白沉淀,影响到提取总量 蛋白质溶液应该是澄清的,可...
单层贴壁
细胞总蛋白
的
提取
答:
本篇文章详细介绍了单层贴壁细胞总蛋白的提取方法和步骤,仅供参考。另外索莱宝公司提供
细胞总蛋白提取
试剂盒,更加方便老师和同学顺利完成单层贴壁细胞总蛋白的提取实验。1. 倒掉培养液,并将瓶倒扣在吸水纸上使吸水纸吸干培养液(或将瓶直立放置一会儿使残余培养液流到瓶底然后再用移液器将其吸走)。2...
要从大鼠皮层神经元中提
蛋白质
,请教具体的操作步骤,越详细越好!是不是...
答:
A.
细胞总蛋白提取
1. 裂解液制备:每500ul冷的Buffer I(蛋白质裂解液)中加入2ul蛋白酶抑制剂混合物,混匀后置冰上备用。2. 取5-10×106个细胞,在4℃,1000rpm条件下离心5-10分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞 3. 用冷PBS洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。4. 每5×106...
如何从动物组织中裂解得到
蛋白
答:
你好,
提取总蛋白
需要蛋白酶抑制剂和裂解液。一般是1:1进行配制。用的裂解液我们是RIPA。将组织用液氮研磨碎了,然后按量加入裂解液,
细胞
量在10七次方左右是100微升。冰浴裂解20分钟(间断摇动)。然后4摄氏度离心12000rpm,15分钟。吸取上清定量。根据测定量的结果将各样品总蛋白量调匀,然后等体积...
做wb,直接收集
细胞
沉淀冻起来可以吗
答:
由于受药物的影响,一些细胞脱落下来,所以应收集培养液中的细胞。以下是培养液中
细胞总蛋白
的
提取
:① 将培养液倒至15ml离心管中,于2500rpm离心5min。②弃上清,加入4ml PBS并用枪轻轻吹打洗涤,然后2500rpm离心5min。弃上清后用PBS重复洗涤一次。③用枪洗干上清后,加100 μL裂解液(含PMSF)冰上...
提取
干
细胞
怎样补营养和吃药
答:
(1) 单层贴壁
细胞总蛋白
的
提取
:1、倒掉培养液,并将瓶倒扣在吸水纸上使吸水纸吸干培养液(或将瓶直立放置一会儿使残余培养液流到瓶底然后再用移液器将其吸走)。2、每瓶细胞加3ml 4℃预冷的pbs(0.01m ph7.2~7.3)。平放轻轻摇动1min洗涤细胞,然后弃去洗液。重复以上操作两次,共洗细胞...
WB实验干货-实验介绍、
蛋白提取
、蛋白定量
答:
由于篇幅限制,本文先介绍组织或
细胞
的蛋白提取和蛋白定量常规流程。蛋白提取:1.组织
总蛋白提取
:准备好所需数量的样本管,放入研磨珠,置于冰盒备用。组织块先用预冷PBS洗涤2-3次,除去血污,放在滤纸上吸干多余的PBS后放入匀浆管中,加入约10倍样本体积的完全裂解液,置于组织研磨仪中,对称放置,确认...
如何一步同时
提取细胞
的总RNA和
总蛋白
?
答:
用sigma公司的trizol试剂(学生,非广告),研磨、裂解、离心之后,RNA在上层,DNA在中层,
蛋白质
在下层(不同层次的颜色不同,可以很容易分辨),然后分别沉淀。可能存在的问题就是物种不同,效果会后差异,DNA层去除对操作有一定的要求,所用的工具必须是去核酸酶、去蛋白酶之后的。
血浆、血清、冻存血
细胞总蛋白
如何
提取
?谢谢!
答:
一般情况下直接用3000转离心5min就能分出血清,但是-80度冻过了,血清就离心不出来了(离心出来的上层所谓血清的部分会有点红,因为一些红
细胞
破裂了)血细胞和血浆的分离可以用12000rpm,离心2min左右,上层就是血浆,下层是血细胞
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