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pcr产物纯化方式
用于与载体连接的
pcr
酶切
产物
是如何
纯化
的
答:
跑胶后找到目的片段,切胶回收,纯化的传统法就是将PCR产物加入2倍体积的乙醇-20度沉淀过夜后低速短暂离心(如 3000rpm离心1~2min),弃掉上清,然后用70%乙醇洗涤一次后,弃掉乙醇,放干后再用无菌水或者TE溶解。当然这种
方法
对
PCR产物纯化
后回收率是很低的,你需要多做几管PCR,然后一起纯化回收。
PCR产物是用胶回收试剂盒还是直接
PCR产物纯化
试剂盒
答:
如果确定PCR产物很纯(没有引物二聚体),完全可以用
PCR产物纯化
试剂盒。如果PCR产物不是很纯,或者PCR扩增条带比较小,PCR产物前面又有较多引物二聚体时,用胶回收,其余用PCR产物纯化试剂盒。
pcr纯化
试剂盒和胶回收试剂盒的区别:
PCR纯化
试剂盒:是直接水溶解的PAC产物就可以回收,回收效率高,但是只...
胶回收试剂盒和
PCR
回收试剂盒的区别
答:
如果确定PCR产物很纯(没有引物二聚体),完全可以用
PCR产物纯化
试剂盒。如果PCR产物不是很纯,或者PCR扩增条带比较小,PCR产物前面又有较多引物二聚体时,用胶回收,其余用PCR产物纯化试剂盒。
pcr纯化
试剂盒和胶回收试剂盒的区别:
PCR纯化
试剂盒:是直接水溶解的PAC产物就可以回收,回收效率高,但是只...
pcr产物
回收与胶回收区别
答:
试剂盒不同。
PCR纯化
试剂盒:是直接水溶解的PAC产物就可以回收,回收效率高,但是只适合单一条带需要纯化测序的时候使用;PCR凝胶试剂盒:是在
PCR产物
是混合物,有多条杂带的情况下,先跑胶将杂带分离,然后在将所要的条带位置的胶切下回收,后者的回收效率低,但是很纯净。
PCR产物
的检测
方法
有哪些
答:
琼脂糖凝胶电泳 这是实验室最常用
的方法
,简便易行,只需少量DNA即可进行实验。其原理是不同大小的DNA分子通过琼脂糖凝胶时,由于泳动速度不同而被分离,经溴化乙锭(EB)染色,在紫外光照射下DNA分子发出荧光而判定其分子的大小。用于电泳检测
PCR产物
的琼脂糖浓度常为1%—2%,应该使用纯度高的电泳纯级...
怎么把mrna从rna中
纯化
答:
目前常用的mRNA的
纯化方法
有:(1)寡聚(dT)-纤维素柱层析法,即分离mRNA的标准方法;(2)寡聚(dT)-纤维素液相离心法,即用寡聚(dT)-纤维素直接加入到总的 RNA溶液中并使mRNA与寡聚(dT)-纤维素结合,离心收集寡聚(dT)-纤维素/mRNA复合物,再用洗脱液分离mRNA,然后离心除去寡聚(dT)-纤维素;(3)其它一些方法:...
pcr产物
没有
纯化
能够直接进行双酶切吗?
答:
不可以。\x0d\x0a首先,采用的是质粒模板;\x0d\x0a其次,扩增得到的非单一条带,如果不
纯化
直接酶切,那么得到的将是带有相应酶切位点的几种片段,继续试验的话,菌落PCR鉴定时可能会出现几种不同大小的条带。\x0d\x0a\x0d\x0a第三、
PCR产物
里面缓冲液并不是合适的酶切缓冲液,会极大...
pcr纯化
试剂盒和胶回收试剂盒有什么区别
答:
不是的,
PCR纯化
试剂盒—是直接水溶解的PAC产物就可以回收,回收效率高,但是只适合单一条带需要纯化测序的时候使用。PCR凝胶试剂盒—是在
PCR产物
是混合物,有多条杂带的情况下,先跑胶将杂带分离,然后在将你所要的条带位置的胶切下回收,后者的回收效率低,但是很纯净。古朵生物 纯化试剂盒 ...
简述
PCR
技术的基本原理及反应条件的选择
答:
在PCR反应中,应为~,尤其是注意种的浓度要相等等摩尔配制,如其中任何一种浓度不同于其它几种时偏高或偏低,就会引起错配。浓度过低又会降低
PCR产物
的产量。能与2+结合,使游离的2+浓度降低。模板核酸的量与纯化程度,是PCR成败与否的关键环节之一,传统的DNA
纯化方法
通常采用和蛋白酶来消化处理标本。的主要功能是: ...
双酶切时,
PCR
样为何需
纯化
?
答:
首先,你用的是质粒模板;其次,你扩增得到的非单一条带,如果不
纯化
直接酶切,那么得到的将是带有相应酶切位点的几种片段,继续试验的话,菌落
PCR
鉴定时可能会出现几种不同大小的条带,运气好的话也会有阳性克隆。你也可以做个试验尝试下。
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