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dna提取时裂解液怎么配
细胞
裂解液
各成分的作用
答:
细胞
裂解液
各成分的作用:1、第一种50mmol/L Tris-HCl是缓冲液,保证细胞
裂解时
PH值也能稳定,Tris是一种有机碱。2、第二种1.0 mmol/L EDTA是一种金属螯合剂。3、第三种150 mmol/L NaCl是等渗体系电解质,用于协调细胞膜内外离子平衡。4、第四种0.1% SDS是十二烷基硫酸钠,是一种表面活性...
dna的提取
方法
答:
用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中
提取DNA
.由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,因为阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取DNA.(3).苯酚抽提法:苯酚作为蛋白变性剂,同时抑制了DNase的降解作用.用苯酚处理匀浆
液时
,由于蛋白与DNA 联结键已...
dna提取
过程中的关键步骤及注意事项有哪些
答:
1、
裂解液
要预热,以抑制DNase,加速蛋白变性,促进DNA溶解.2、 酚一定要碱平衡.苯酚具有高度腐蚀性,飞溅到皮肤、粘膜和眼睛会造成损伤,因此应注意防护.氯仿易燃、易爆、易挥发,具有神经毒作用,操作时应注意防护.3、 各操作步骤要轻柔,尽量减少
DNA的
人为降解.4、 取各上清时,不应贪多,以防非核酸类...
为什么配得
DNA裂解液
浑浊
答:
你这个配方肯定是错的或者是你没看清楚,少了一半,浓度太高。象EDTA (pH 8.0) 500 mmol/L,应该是加入1/100体积左右,而SDS 10%,应该是加入1/10体积。你可以再确认一下或者找一下别的文献参考一下。
求博凌科为的血液
基因组DNA提取
试剂盒说明书?
答:
然后蛋白沉淀液选择性沉淀去除蛋白,最后纯净的
基因组dna
通过异丙醇沉淀并重溶解于dna溶解液。产品特点:从十几个配方中优选出的红细胞
裂解液
配方,裂解快速完全。不需要使用有毒的苯酚等试剂。快速,简捷,单个样品操作一般可在30分钟内完成。结果稳定,产量高(典型的产量300µl全血可
提取
出4-15...
提取DNA
最后棕黄色沉淀
怎么
解决
答:
提取DNA
最后棕黄色沉淀怎么解决 提取DNA要快,特别是加入的
裂解液
要有巯基乙醇,防止提取过程中材料氧化。你提的DNA有棕色沉淀,我估计是材料氧化造成的。即使有DNA,质量也不好。建议重新提取。现在离心管里加入裂解液,然后加入材料,然后放入水浴锅。要快,这样提取应该没有棕色。
植物
dna提取时
杂质有哪些,
如何
去除
答:
杂质:多酚类、糖类物质较多 去除方法:材料粉碎后,在加细胞
裂解液
前,加入一些缓冲液清洗来除去多糖:缓冲液配比(100mmol/L Tris-HCl,pH8.0;100mmol/L EDTA;250mmol/L NaCl;50ug/mL蛋白酶K;1%月桂酸钠Nalauroylsarcosine),50度保温过<Rozman和Komel,1994>,或者只用100mmol/L Tris-HCl...
全血
DNA提取
用哪种抗凝剂好
答:
全血
基因组DNA提取
试剂盒使用说明:使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。样品的处理(本产品适用于处理新鲜的或已经添加抗凝剂的0.lmL-1mL血液样品):a、在血液样品中加入2-3倍体积的红细胞
裂解液
,充分颠倒混匀,12000rpm离心1...
...跑琼脂糖胶基本上没有主带,
怎样
才能
提取
高质量的
DNA
?
答:
是用SDS法提的吗?你首先确定SDS
裂解液配
的有没有问题,一般这个溶液配好了其它的溶液不会有大问题。
DNA
酶污染的情况并不常见,只要灭菌了不会有问题。DNA用百分之百乙醇析出的步骤容易造成机械损伤,加乙醇后要快点混匀。适当降低离心的转数,操作动作轻一点,防止机械断裂 补充:叶片取下来要零度保存...
DNA提取
过程中的关键步骤及注意事项有哪些?
答:
1、
裂解液
要预热,以抑制DNase,加速蛋白变性,促进DNA溶解。2、 酚一定要碱平衡。苯酚具有高度腐蚀性,飞溅到皮肤、粘膜和眼睛会造成损伤,因此应注意防护。氯仿易燃、易爆、易挥发,具有神经毒作用,操作时应注意防护。3、 各操作步骤要轻柔,尽量减少
DNA的
人为降解。4、 取各上清时,不应贪多,以防非...
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