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dna提取时裂解液怎么配
DNA提取
过程中的关键步骤及注意事项有哪些
答:
DNA提取
的完整步骤 :1. 取新鲜或冷冻样品的肌肉组织100ul-200ul或95%ALC保存的样品组织0.05g。 2. 将组织尽量剪碎,分别装入1.5ml 的离心管中。3. 每管中加入450ul的
裂解
缓冲液(10mM Tris-HCl pH8.0; 100mM EDTA, pH8.0)4. 每管加入10% SDS 50-100ul(70-80不定) (1-2%),再...
人血
提取
基因组
答:
用时加10-20ml 3.800-1000rpm离心5-8分钟,离心弃去上层红色清
液
;4.收集沉淀部分,加入Hank’s液或无血清培养液离心洗2-3次;5.如
裂解
不完全可重复步骤2和3;6.重悬细胞,用于后续实验;
提取DNA
,最好是于步骤4开始使用DEPC水配制的溶液进行.酚氯仿方法提取DNA 在
DNA提取
过程中应尽量避免使DNA...
求助:细菌
DNA提取
的方法
答:
1 快速微量
提取
法 A.取1.5ml菌体培养物于一灭菌Ep管中,12000rpm离心1min, 丢去上清夜,收集菌体.B.加入400ul
裂解液
(40mMTris-醋酸,20mM醋酸钠,1mMEDTA,1%SDS,pH7.8)混匀,置于37oC水浴1hr.C.然后加入200ul5mol/L的氯化钠溶液,混匀后于13000rpm离心15min.D.取上清液,用苯酚抽提2次,氯仿...
...全血
基因组DNA提取
试剂盒(溶液型) 组成是
怎样
的?使用效果
如何
呀?有...
答:
试剂盒特点:◆ 从十几个配方中优选出的红细胞
裂解液
配方,裂解快速完全。◆ 不需要蛋白酶K,不需要酚/氯仿抽提。◆ 快速,简捷,单个样品操作一般可在30分钟内完成。◆ 结果稳定,产量高(典型的产量300μl 全血可
提取
出5-15μg),
DNA
纯度达1.7~2.0(OD260/OD280),长度可达50Kb...
...初次做蜡块组织
DNA提取
希望多多指教。 方法具体点哦
答:
操作中常加入RNase除去RNA,此法可获得100~200kb的
DNA
片段,适用于构建真核基因组文库,Southern blot分析。【试 剂】1、组织细胞
裂解液
100~200μg/ml 蛋白酶K 10mmol/L Tris-Cl(pH8.0)0.1mol/L EDTA (pH8.0)0.5% SDS 20 μg/ml RNase A 2、平衡酚(用0.5...
土壤
DNA提取
试剂盒原理与操作
答:
在土壤
DNA提取
过程中,首先,将土壤样品与悬浮缓冲液Buffer C1混合,随后加入玻璃珠和专利的腐殖酸吸附剂Buffer C2。通过涡旋搅拌,土壤充分分散,使腐殖酸能有效从土壤中释放出来,吸附在吸附剂上。接着,加入高效
裂解液
Buffer C3,借助玻璃珠的摩擦作用,裂解土壤中的各种生物,包括G+细菌、酵母菌、真菌...
SDS碱
裂解
法制备质粒
DNA的
具体操作步骤是
怎么样
的?那位大侠给力点,帮...
答:
质粒已成为目前最常用的基因克隆的载体分子,重要的条件是可获得大量纯化的质粒DNA分子。目前已有许多方法可用于质粒
DNA的提取
,本实验采用碱裂解法提取质粒DNA。碱裂解法是一种应用最为广泛的制备质粒DNA的方法,其基本原理为:当菌体在NaOH和SDS溶液中
裂解时
,蛋白质与DNA发生变性,当加入中和液后,质粒...
粪便
DNA
如何
采集
答:
般的革兰氏阳性菌、肠道脱落细胞,进行 步骤 4 操作; b) 对于细菌壁较厚的革兰氏阳性菌、真菌、细菌芽孢等 ,粪便可先用液氮反复 研磨 , 取研磨后的粪便约 200mg
提取
DNA
。4. 加入 200μL
裂解液
Ⅰ,悬浮沉淀,37℃放置 30 分钟。5. 加入 200 μL 裂解液Ⅱ, 20μL 消化液,充分振荡...
血
液提取DNA的
有关问题
答:
min
裂解
。加入100 μl 5 M 氯化钠充分振荡沉淀去除蛋白质。10 000 r离心5 min,取上清。加2.5倍体积的无水乙醇沉淀DNA后,10 000 r离心5 min,弃上清。室温晾20 min左右待酒精挥发干净后以适量TE缓冲液(10 mmol/L Tris?HCl,pH 8.0,1 mmol/L EDTA)回溶。EDTA抗凝血中
DNA的提取
从去掉...
真菌的
DNA提取
方法有哪些,要详细操作步骤
答:
DNA提取液
:0.2M Tris-HCl(pH 7.5),0.5M NaCl,0.01M EDTA,1%SDS,3M NaAc (二)1.真菌菌丝0.5-1 g, 在液氮中迅速研磨成粉 2.加入3 mL 65℃预热的DNA提取缓冲液,快速振荡混匀65℃水浴30 min, 期间混匀2-3次 3.加入1 mL 5M KAc,冰浴20 min 4.等体积的氯仿:异戊醇(...
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