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等电点测定方法有哪些
测定等电点
的
方法有哪些
?
答:
交错分配法.对一种特定的蛋白质
,在不同盐系统中,pH和其分配系数之间的关系应不同,而在等电点时,得到的均为不带电时分子的分配系数.对不同的盐系统,其等电点时的分配系数应相等,两条pH和分配系数关系的曲线必交于一点,该点所对应的pH值即为该特定蛋白质的等电点.根据这一原则测定蛋白质等电点...
蛋白质
等电点测定方法
答:
要测定蛋白质的等电点,
一种常用的方法是采用平板等电聚焦技术
。该方法基于蛋白质分子在特定环境下,如Bio-Rad Model 111Mini IEF Cell这种仪器中,能够在连续且稳定的线性pH梯度中进行电泳。在此过程中,蛋白质并不单纯按照等电点的不同进行分离,而是根据其电荷特性在pH梯度中移动。进行样品处理时,...
等电点
是什么意思?
答:
4. 等电点的测定:等电聚焦法:这是一种特殊的电泳
,其载体上铺有连续的PH梯度的缓冲液,然后将氨基酸点样,只要该处的PH与氨基酸的PI不同,则氨基酸就会带电,PH值>PI时,aa带-电;PH值<PI时,aa带+电。通电后,氨基酸就会移动,直到某处的PH=PI,氨基酸才呈电中性,不再移动,因此,可以测出...
在蛋白质等电子
测定
过程中,如何根据实验现象判断酪蛋白的
等电点
?
答:
1)最小溶解度法
。蛋白质在不同pH溶液中形成不同的浊度来测定,即最大浊度处的pH值为蛋白质的等电点值。浑浊最严重时的pH值,即为酪蛋白的等电点。2)
等电聚焦法
。等电聚焦完成后,切成胶条,测量不同段的pH值,并用三氯醋酸显色,即可确定酪蛋白的等电点。
名词解释
等电点
答:
蛋白质所带正电荷与负电荷恰好相等(总净电荷为零)时,在电场中既不向阳极移动,也不向阴极移动
。蛋白质在等电点时,因为没有相同电荷而互相排斥的影响,所以最不稳定,溶解度最小,极易借静电引力迅速结合成较大的聚集体,因而沉淀析出。同时蛋白质的黏度、渗透压、膨胀性以及导电能力均为最小。
解释如何蛋白质
等电点
的
测定
答:
近年来蛋白质的
等电点
可以采用等电聚焦技术加以准确
测定
,但需一定的实验条件。本实验采用蛋白质在不同pH溶液中形成的混浊度来确定,即混浊度最大时的pH值即为该种蛋白质的等电点值,这个
方法
虽然不很准确,但在一般实验条件下都能进行,操作也简便。四、操作步骤:1.制备蛋白质胶液 (1)称取酪...
等电点
的
测定方法
?
答:
你配置水溶液,PH调到10,滴加稀盐酸,同时测PH和电导率,作图能求出来
测量
蛋白质
等电点
的
方法有哪些
?谢谢
答:
测定等电点
的
方法
是在不同pH条件下
测量
蛋白质的电泳迁移率,然后用迁移率对pH作图,对应于迁移率为零的pH就是蛋白质的等电点。按照蛋白质等电点不同而进行分离的电泳方法称为蛋白质等电聚焦电泳。由于其分辨率可达到0.01pH单位,故特别适用于分离分子量相近而等电点不同的蛋白质组分。
蛋白质
等电点
的
测定方法
答:
●
方法
:平板等电聚焦●原理:蛋白质分子在含有载体两性电介质形成的连续而稳定的线性pH梯度中进行电泳。但不自是按照
等电点
不同被分离。●仪器:Bio-Rad Model 111Mini IEF Cell●样品要求:●液体:浓度>3mg/ml;体积>200ul;固体:质量>200ug●样品纯度>90%;含盐量<3 0mM;分子量:一般要求...
质粒可以测
等电点
吗
答:
物质的净电荷为零的pH值,质粒是DNA分子的载体,其中的DNA序列带有负电荷,当质粒处于溶液中时,会根据其化学性质带有负电荷,因此质粒的
等电点
也可以通过pH值来
测定
,具体
方法
是将质粒溶液中的pH值逐渐调节,直到质粒带有的负电荷和带有的正电荷相等时,等电点即可被确定。
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