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如果提取的质粒DNA污染有少量染色体DNA,你们在操作过程中哪既不最可能出现问题
如题所述
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推荐答案 推荐于2017-12-16
.
加入裂解液的时候颠倒混匀的动作幅度太大,
会导致基因组DNA断裂成小片段,和质粒混在一起。
沉淀以后,吸取上清液的时候不小心吸入沉淀,
会把夹在沉淀中的基因组DNA也一起吸入硅胶吸附柱,
这一步的可能性更大,通常都是这一步混入的基因组DNA。
.
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其他回答
第1个回答 2008-11-11
把问题写明白了再问效果最最佳。看到你的问题就一个字,晕!!!
第2个回答 2008-11-11
问题不清楚。
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如果
你
提取的质粒DNA污染有少量
的染成体
DNA,
那么你
在操作过程中哪
你步...
答:
去除
染色体DNA
主要是通过其在pH12~12.5碱变性,然后复性速度比
质粒DNA
慢,所以能够分离的。溶液Ⅱ就是让DNA碱变性。如果你是自己溶液Ⅱ的话,就一定要现配先用,才能保证pH范围控制在12~12.5间。又或者由于加入溶液Ⅲ后体系就会立即形成一层沉淀
,如果
没有立即摇匀,就会使溶液接触不充分以至不能充分...
提取染色体dna的
基本原理
,操作中
注意什么
答:
DNA与组蛋白构成核小体,核小体缠绕成中空的螺旋管状结构,即染色丝,染色丝再与许多非组蛋白形成
染色体
。染色体存在于细胞核中,外有核膜及胞膜。从组织中
提取DNA
必须先将组织分散成单个细胞,然后破碎胞膜及核膜,使染色体释放出来,同时去除与DNA结合的组蛋白及非组蛋白。注意事项:1.尽量简化操作步骤...
细菌细胞中
,染色体DNA
和
质粒DNA在质粒提取过程中
发生了什么变化?该变化...
答:
碱性条件下
,染色体DNA
双螺旋结构解开而变性
,质粒DNA
的氢键断裂但两条互补链彼此缠绕。恢复中性时,染色体DNA难以复性,质粒DNA分子很快复性,离心时染色体DNA与细胞碎片一起被沉淀出来,而质粒DNA则留在上清液中。
质粒的提取
方法
答:
从具体操作方法分可以分为碱裂解法、煮沸法、牙签法等。在氢氧化钠(pH12.0-12.6碱性环境)和去污剂SDS的作用下,细菌蛋白质变性,细胞破裂,细菌
染色体DNA
变性,双链DNA氢键断裂,DNA双螺旋结构遭破坏而发生变形。但由于
质粒DNA
相对分子质量较小,公价闭环的DNA虽然变性但仍处于拓扑缠绕状态,呈环状超...
...形式存在的
染色体dna
和
质粒dna,在质粒提取过程中
发生什
答:
质粒的实质是细胞质内
含有DNA的
细胞器,线粒体 叶绿体 都属于质粒的 而且细菌是原核生物 其核为拟核 不能说是
染色体
你问的太模糊了 是怎么提取?不同方式 效果不同
碱性裂解法
提取质粒
原理
答:
碱性裂解法
提取质粒
原理如下:在pH12.0~12.6碱性环境中,细菌的线性大分子量
染色体DNA
变性分开,而共价闭环
的质粒DNA
虽变性但仍处于拓扑缠绕状态。将pH调至中性并有高盐存在及低温的条件下,大部分染色体DNA、大分子量的RNA和蛋白质在去污剂SDS的作用下形成沉淀,而质粒DNA仍然为可溶状态。通过离心,可...
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