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DNA试剂盒,其中有一步是裂解液加入巯基乙醇,请问这个巯基乙醇可以直接加入整瓶裂解液配好吗?
如题所述
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相似回答
做
SDS-PAGE前,提取蛋白的
裂解液
中用不用加SDS和
巯基乙醇
答:
1、做纯化时
,裂解液可以
加
巯基乙醇,
但DTT效果更好(非NI柱纯化),SDS没必要加。2、在loading buffer加SDS,100度5分钟,是变性方法。SDS与蛋白等量结合
,可以
通过条带位移判断蛋白大小,考染不会影响结果。
我提的
DNA是
棕色的沉淀
答:
提取DNA要快,特别
是加入
的裂解液要
有巯基乙醇,
防止提取过程中材料氧化。你提的
DNA有
棕色沉淀,我估计是材料氧化造成的。即使有
DNA,
质量也不好。建议重新提取。现在离心管里
加入裂解液,
然后加入材料,然后放入水浴锅。要快...
提取
DNA
最后棕黄色沉淀怎么解决
答:
提取DNA要快,特别
是加入
的裂解液要
有巯基乙醇,
防止提取过程中材料氧化。你提的
DNA有
棕色沉淀,我估计是材料氧化造成的。即使有
DNA,
质量也不好。建议重新提取。现在离心管里
加入裂解液,
然后加入材料,然后放入水浴锅。要快...
DNA
提取的问题,大家帮忙啊! 只剩这么多分了,望见谅啦!
答:
至于
巯基乙醇,
我们都是在研磨好,加酚氯仿之前的细胞
裂解液
里加0.5%的巯基乙醇。酚如果觉得氧化了就换一瓶吧。离心转速一般在10000-13000rpm,都没问题
,DNA
很坚强,浓度又不高,没关系的。其实Tris饱和酚的pH值本身就在7...
蛋白沉淀
答:
第四步加了
裂解液
就分开了。
提rna时必须
加入巯基乙醇
吗
答:
是。为了达到更好的RNase抑制效果,往往会在
裂解液
中额外
加入巯基乙醇
。巯基乙醇具有较强的挥发性,为更安全的提取RNA。RNase活性的抑制效果决定了RNA提取的完整性。裂解液中的变性剂,能够使蛋白变性、抑制RNase的活性。
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