蛋白沉淀

二、植物组织蛋白质提取方法
氯醋酸—丙酮沉淀法
1、在液氮中研磨叶片
2、加入样品体积3倍的提取液在-20℃的条件下过夜,然后离心(4℃8000rpm以上1小时)弃上清。
3、加入等体积的冰浴丙酮(含0.07%的β-巯基乙醇),摇匀后离心(4℃8000rpm以上1小时),然后真空干燥沉淀,备用。
4、上样前加入裂解液,室温放置30分钟,使蛋白充分溶于裂解液中,然后离心(15℃8000rpm以上1小时或更长时间以没有沉淀为标准),可临时保存在4℃待用。
药品:提取液:含10%TCA和0.07%的β-巯基乙醇的丙酮。第二步等于直接沉淀了,沉淀下来的不光是蛋白一,还有很多磨碎的残渣一大堆啊,怎么分离?

第1个回答  2010-12-24
第四步加了裂解液就分开了。
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