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DNA裂解液存放条件
抑制物去除
液
IR在
dna
提取中的作用
答:
2.不合适的储存于低温(4℃或者-20℃)会造成溶液沉淀
,影响使用效果,因此运输和储存均在室温下(15℃-25℃)进行。3.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
裂解液
与蛋白酶k是否可以放在一起
储存
答:
dna裂解液
的作用是破坏细胞膜、核膜,并使组织蛋白与dna分离,抑制细胞中dnase的活性,而蛋白酶k的作用是将蛋白质降解成小肽或氨基酸,使dna分子完整地分离出来!由此可见,dna裂解液对蛋白酶k并没有影响!
裂解液
与蛋白酶k是否可以放在一起
储存
答:
裂解液貌似常温保存也可以
,我前几天提DNA用的裂解液就是在常温下放了一年的 结果还不错
DNA
提取过程中的关键步骤及注意事项有哪些?
答:
1. 取新鲜或冷冻样品的肌肉组织100ul-200ul或95%ALC保存的样品组织0.05g
。 2. 将组织尽量剪碎,分别装入1.5ml 的离心管中。3. 每管中加入450ul的裂解缓冲液(10mM Tris-HCl pH8.0; 100mM EDTA, pH8.0)4. 每管加入10% SDS 50-100ul(70-80不定) (1-2%),再加入2.5-5ul(3u...
DNA
提取的问题
答:
1)实验材料量太少,建议适当增加增加样本量;2)样品裂解不充分。保持样本量不变的情况适当增加裂解液
。使用液氮或匀浆器对样品进行研磨和匀浆,使其充分混匀,适当延长裂解时间;3)
提取材料质量不好
。保证样品本身DNA含量,尽量选用富含核酸的组织或新鲜组织提取基因组DNA,样品采集后应尽快保存在 -80℃或...
dna
分子的结构是
答:
氢键)碱基互补配对原则。
DNA
分子是由2条平行的多核苷酸链围绕同一中心轴构成的右手双螺旋结构(B型DNA)。多种芏酸的方向由核苷酸间的磷酸二酯健的走向决定,一条从5’→3’,另一条从3’→5’,两条链呈反向平行排列(antiparallel),彼此由氢键相连,G 与C配对(G≡C),A与T配对(A=T)。
细胞
裂解
后可以放冰箱
保存
吗
答:
主要分为化学法和机械法,前者比较温和,后者虽然产量高,但反应更剧烈,很有可能造成细胞中的
DNA
断裂。
裂解
方法包括化学裂解、酶裂解和机械裂解。化学裂解和酶裂解通常是比较温和的方法,通常会很少使DNA 断裂。这两种方法(包括SDS 和溶菌酶处理等)提取纯化DNA中常用的方法。机械裂解可以更均一的裂解细胞...
分子实验查漏补缺系列:SDS碱
裂解
法制备质粒
DNA
视频时间 25:24
请教:细菌
DNA
的提取
答:
操作最简便,对试剂
条件
要求低。缺点是纯度不够高,可能会含有RNA、蛋白等杂质。但是作为一般检测目的的PCR反应模板已经足够了。二、CTAB/NaCl 法 CTAB/NaCl法提取的
DNA
纯度较高,蛋白杂质较少,
保存
时间长,编者更喜欢把终浓度为20μg/ml RnaseA加在第5步温育的时候,这样最后没有RnaseA污染。每一步...
病毒
保存液
是什么?
答:
1、灭活型:添加有
裂解
盐的病毒
保存液
就是灭活型的病毒保存液,里面含有的Tris、裂解盐、EDTA等主要目的是裂解核酸而释放出核酸,从而通过后续的实时荧光RT-PCR进行核酸检测,以此判断样本是否含病毒特征核酸,即是否感染病毒。核酸是由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物,包括脱氧核糖核酸(
DNA
)和核糖核酸(...
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