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WB跑胶后没有条带是什么原因
如题所述
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推荐答案 2016-12-30
提取细胞蛋白加1ml裂解液实在是有点多,你可以减少到200-300ul试试,提取蛋白后做个BCA蛋白定量,在做后续的考蓝染色,确定蛋白没有问题再电泳转膜
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WB
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条带
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答:
2.
条带
为何如此淡?信号微弱条带浅淡,如同影子一般,信号弱,可能是:抗体浓度过低(★)?解决:适当提高抗体浓度,预实验调至最佳。操作细节:转膜或孵育不足(★)?调整:优化转膜参数,延长孵育时间。样本问题:蛋白降解或含量低?应对:重新制备或增加上样量,避免HRP抑制剂干扰。细节决定成败,每...
...用考马斯亮蓝染色,
之后
怎么都看不到
条带
?
是什么原因
呢?
答:
可能原因:蛋白上样量太少,蛋白转过去了,蛋白还没转到膜上去,丽春红灵敏度不够
。。。你的蛋白是单一蛋白还是总蛋白?如果是总蛋白,而且上在同一道上,那就没必要做后面的了。
很可能是转膜失败
。
wb
电泳为
什么
不在一条线上
答:
wb电泳不在一条线上的原因:
1、样本本身含有高盐。2、积层胶长度不足
,一般样品1-2cm足矣。但是如果样本含有高盐可以考虑将积层胶加长到4cm左右。3、缓冲液需要更换。使用多次的Buffer缓冲能力会大打折扣,如果样品珍贵难得推荐用新鲜配制电泳缓冲液,反之用3次就丢弃。4、上样量有关。5、电压不要...
wb
内参可以跑出来,目的基因
条带
却
没有
答:
很正常
。内参有证明蛋白样品没问题。没有目的带原因很多。1.目的蛋白是否表达量很低,因为内参表达是很高的。2.抗体的选择是否有问题,有没有阳性对照?? 是一点都没有?还是能看到一点点?高保真生物技术有限公司~实验整体外包服务商~
WB
显色的机器
叫什么
答:
如果整张膜都发光,压片后胶片上
没有条带
,整个一片都是黑乎乎的,应该是曝光过度
了
,和封闭没有太大关系.建议改进方法:降低上样量、降低一抗或二抗浓度、降低抗体孵育时间、改用效果不那么强的发光液(如果只有一种发光液,可以将其用水稀释后再用),总之使用一切能减少曝光强度的方法.整张膜都发光的...
...很弥散,无法辨别有几
条带
,请问
什么原因
可以导致啊?
答:
如果只是marker不清晰,就是markr没煮好,或者降解
了
。重新换一个新marker,严格按配方煮。如果所有
条带
都这样那就是
胶
的问题。胶的前沿跑的齐吗?速度如何?如果跑的时候就不正常那也可能是电泳缓冲液配错了。
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