从高等生物基因组中克隆的完整基因为什么在大肠杆菌中不能正确表达?

原题如下:从高等生物基因组中克隆的完整基因为什么在大肠杆菌中不能正确表达?如果想让人的胰岛素基因在细菌中表达生产人胰岛素,至少应满足那些条件?
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真核生物与原核生物的启动子不同。而且真核生物的基因通常是间隔基因,即外显子和内含子相间排列。真核生物的完整基因直接转入大肠杆菌,没用相应的启动子不能启动mRNA转录,而且内含子也不能正确剪切,当然不能正确表达。
利用胰岛素的mRNA进行RT-PCR,扩增出它的cDNA,再将cDNA连接在有完整表达单元的载体上,转入细菌中表达。
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第1个回答  2007-07-27
1.真核基因启动子不能被原核RNA聚合酶识别转录不能正确起始;从 真核基因组克隆的基因含有内含子,大肠杆菌没有转录后剪接系统。
2.A.需有适当运载体将人胰岛素基因置入细菌

B.需有适当的酶对运载体与人胰岛素基因进行切割与黏合

C.重组后的运载体DNA,须在细菌体内转录、翻译成人胰岛素
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