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蛋白表达在沉淀
为什么
表达
的
蛋白
会变性
沉淀
答:
我想应该是不同的
表达
菌株有不同的合成酶系以及修饰和转运方式,例如大肠杆菌没有信号肽和分子伴侣,所以很多外源
蛋白
的表达是以包涵体形式出现
在沉淀
里,而酵母菌能够进行糖基化和跨膜运输,就能够外分泌可溶表达.别说...
原核
蛋白表达
,总是
在沉淀
中,怎么解决
答:
应该是原核表达宿主菌比较准确 原核表达宿主菌之前可以
表达蛋白
,放一段时间不表达蛋白原因很多 首先要确认其他条件是否也有改变,比如其他基因,质粒载体,表达条件等等 原核表达宿主菌保存条件没有控制好可能导致宿主菌退化,被污染等等,结果就造成
蛋白表达
变少或者不表达。
真核
蛋白表达在
细胞超声
沉淀
中该怎么办
答:
因为原核生物缺乏翻译后的修饰,所以
表达
的真核
蛋白
和真核中表达有所差异,可能没有生物学活性等,但是要是做免疫原应该没问题; 基因需为cDNA,不能含有内含子,原核细胞不能对mRNA进行剪切; 要分析DNA序列信息,分析其密码子,由于原核与真核。
为什么
蛋白在
盐的溶液里会
沉淀
?
答:
蛋白溶液容易发生沉淀的情况有 1,
pH等于pI,此时表面静电荷为零,蛋白分子相互之间的作用力减弱,容易凝聚而产生沉淀
。2,pH过酸或者过碱,此时pH环境过于剧烈,不利于蛋白质保持其空间结构,容易发生变性而沉淀。3,加入重金属离子,蛋白可能会重金属离子结合形成难溶性的盐而沉淀。综合来看,你的实验很容...
沉淀蛋白质
的方法五种
答:
蛋白质从溶液中析出的现象,称为蛋白质的沉淀
。蛋白质沉淀常用的方法有盐析法、等电点沉淀法、有机溶剂沉淀法、重金属盐沉淀法、生物碱试剂与某些酸(如三氯醋酸)沉淀等。盐析法 在蛋白质溶液中加入大量的硫酸铵、硫酸钠或氯化钠等中性盐,破坏蛋白质的水化膜和中和电荷,使蛋白质颗粒相互聚集,...
表达
菌不同会造成
蛋白在
上清与
沉淀
的不同吗
答:
所以很多外源
蛋白
的
表达
是以包涵体形式出现
在沉淀
里,而酵母菌能够进行糖基化和跨膜运输,就能够外分泌可溶表达。别说是不同的菌株了,就算是同一种菌株在不同温度和诱导条件下也可能对同一蛋白出现不同的表达策略,例如GST标签的蛋白就经常在大肠杆菌里以低温进行可溶性表达。
为什么
表达
的
蛋白
会变性
沉淀
答:
沉淀可以是由蛋白质变性从而产生沉淀,也可以是由于盐析.蛋白质变性是指光照,热,有机溶济以及一些变性剂(如重金属盐)的作用时蛋白质的空间结构被破坏,使得蛋白质丧失活性,该过程不可逆.盐析是指向蛋白质的溶液中加入轻金属盐,使得
蛋白质沉淀
析出,这是由于加入盐降低了蛋白质得溶解度而析出,该过程可逆,...
蛋白质
的
沉淀
反应是什么?
答:
蛋白质
的沉淀反应可分为以下两种类型:1、可逆沉淀反应:沉淀反应发生后,蛋白质分子内部结构并没有发生大的或者显著变化。
在沉淀
因素去除后,又可恢复其亲水性,这种沉淀反应就是可逆沉淀反应,也叫做不变性沉淀反应。属于这类沉淀反应的有盐析作用、等电点沉淀以及在低温下短时间的有机溶剂沉淀法等。2、...
蛋白质
的
沉淀
反应
答:
1号管有乙醇,还有缓冲液(缓冲液就是由酸碱组成的),1号管沉淀了,你要说明这是因为乙醇而不是缓冲液啊。所以你需要二号三号管来证明,酸和碱都没有使
蛋白质沉淀
(因为变性的蛋白质被酸碱溶解了),而且中和之后就发现沉淀出现了,说明沉淀是因为乙醇而不是酸碱。至于甲基红,是为了指示酸碱度,你...
如何判断
蛋白质在
酸性溶液中产生
沉淀
?
答:
(1)可逆沉淀:在温和条件下,通过改变溶液的pH或盐浓度等,使
蛋白质
从胶体溶液中沉淀出来。
在沉淀
过程中,蛋白质的结构和性质都没有发生显著变化,在适当的条件下,蛋白质可以重新溶解形成溶液,所以这种沉淀又称为非变性沉淀。可逆沉淀是分离纯化蛋白质的基本方法,如等电点沉淀法、盐析法(saltingout)等,...
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