伊红美蓝伊红美蓝培养基

Question

如题所述

Answer 1

伊红美蓝培养基（Eosin-Methylene Blue Medium, 简称EMB medium）是一种专门用于检测大肠杆菌的实验室工具。其工作原理基于伊红和美蓝两种染料的特性。大肠杆菌在分解乳糖产生酸时，会带有正电荷，被伊红染成红色，与美蓝结合后形成具有紫黑色和绿色金属光泽的菌落。相反，不分解乳糖且在碱性环境下不产酸的细菌，如沙门氏菌，会形成无色或琥珀色半透明菌落，而金葡萄球菌则不会在EMB培养基上生长。

在水质检测中，常用的伊红美蓝乳糖培养基可用于鉴别饮用水和乳制品中的大肠杆菌。当大肠杆菌存在时，它们分解乳糖产生大量酸，菌体带正电荷，导致菌落呈现深紫色，并带有金属光泽。鉴定过程分为几个步骤：

首先，制备伊红美蓝培养基，冷却后倒入培养皿，等待凝固。
取河水或沟水，进行10倍稀释，使用灭菌的工具取0.1毫升进行接种，采用平板划线法分离。
将接种的培养皿置于37℃的温箱中培养18至24小时，大肠杆菌菌落会显现，中心呈暗蓝黑色，有金属光泽。
将观察到的菌落转移到斜面培养基上，进一步研究。
储备培养基的配置需将蛋白胨、乳糖、磷酸氢二钾和琼脂等混合溶解，调整pH，然后灭菌并储存。

制备培养基时，首先溶解蛋白胨、磷酸盐和琼脂，调整pH，然后加入乳糖，加热溶解并分装，经高压灭菌后备用。使用时，需在冷至50至55℃时加入伊红和美蓝溶液，充分混合后倾倒入平板。