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如果一个DNA 酶解液在电泳后发现DNA 未被切动, 你认为可能是什么原因
如题所述
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推荐答案 2009-11-06
很简单嘛,做个对照啊,找个载体质粒(质粒上存在你的限制性内切酶能切开的位点)在相同条件下做酶切,电泳,
观察质粒是否跟预期切开的长度一致,如果长度一致说明内切酶没有问题,你的DNA有问题;
如果电泳长度与理论预期长度不一致,就说明你的内切酶有问题,换一支酶(内切酶是会过期的,请注意保质期)
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其他回答
第1个回答 2009-11-06
可能的原因:
1。酶失活。
2。DNA序列有问题
3。其他的比如buffer啥的 是你自己掌握的 一般不会出问题。本回答被提问者采纳
第2个回答 2009-11-06
这个DNA上没有你用的酶的酶切位点。一个个酶试过来。这个要看RP的
酶浓度过低、酶放置时间过长,本身已经降解……
还有就是你确定那一条带真的是DNA吗
第3个回答 2009-11-05
主要是酶的问题吧……还有看看是不是酶切反应的条件没达到
相似回答
如果一个dna酶解液在电泳后发现dna未被
酶切或者酶切不完全
,可能是什么
...
答:
可能的原因: 1.酶失活. 2.DNA序列有问题 3.其他的
比如buffer啥的 是你自己掌握的 一般不会出问题.
DNA
没有被限制性内切酶切开或者切割不完全怎么办?
答:
(1)缺少识别序列
。(2)
反应条件不合适
。(3)
限制性内切酶对DNA甲基化敏感
。(4)
内切酶稀释不正确或加入方法不正确
。(5)
甘油浓度过高
。(6)限制性内切酶已部分或全部失活。对策:(1)检查底物DNA中是否存在可被限制酶识别的DNA序列。(2)使用随酶提供的反应缓冲液;增大酶量。(3)检查DNA是...
电泳
无
DNA
条带
,什么原因
?
答:
如
在电泳
鉴定质粒纯度时发现凝胶上有数条
DNA
带难以确定是质粒DNA不同构象引起还是因为含有其他DNA引起时,可从琼脂糖凝胶上将DNA带逐个回收,用同一种限制性内切酶分别水解,然后电泳,如在凝胶上出现相同的DNA图谱,则为同一种DNA。4、 电源电压 在低电压时,线状DNA片段的迁移速率与所加电压成正比。但是随...
DNA
酶切及凝胶
电泳
操作步骤
答:
5. 加样:将
酶解液
与载样液混合后,用微量移液*小心加入样品槽,注意控制总体积不超过*。每加完一个样品更换tip头,防止污染。6. 电泳:接通电源,保持60-80V电压和40mA以上电流。观察溴酚蓝条带,当到达凝胶前沿2cm时停止电泳。7. 染色与观察:EB染色后在紫外灯下观察,记录DN*段的荧光条带。...
...内切酶
酶解后电泳,
如何根据迁移率推理出该
DNA分子
内各主要片段的排列...
答:
除非这样做:比如先用酶A切,得到2个,甚至多个片段。再用酶B切,再用酶C切。这样有可能得到不同的片段。然后再用A, B组合,得到的片段长度和A,B单独切所产生的长度比较,可以推出AB酶切位点的相对位置。如此反复。最后可以得到各个酶切位点的位置。不知道是不是你要的方法 ...
DNA分子
标记主要有哪几类(至少写出4类)?它们各自的特点
是什么
?
答:
1 RFLP 该技术由Grodzicker等于1974年创立特定生物类型的基因组
DNA
经某一种限制性内切酶完全
酶解后,
会产生分子量不同的同源等位片段,或称限制性等位片段RFLP标记技术的基本原理就是通过电泳的方法分离和检测这些片段凡是可以引起酶解位点变异的突变,如点突变(新产生和去除酶切位点)和一段DNA的重新组织...
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