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transwell做细胞迁移用的结晶紫怎么配置的哇?怎么染色
如题所述
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推荐答案 2015-07-27
① 用棉签擦去基质胶和上室内的细胞 ② 染色:采用0.1%
结晶紫
染色。 这种方法有如下优势:(1). 不需要固定细胞,直接染色即可。(2). 配制简单方便。(3). 染色后可以用33%
醋酸
脱色,将结晶紫完全洗脱下来,洗脱液可在酶标仪上570nm 测其OD值,间接...
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求助
做transwell
时
结晶紫染色
的具体详细步骤
答:
① 用棉签擦去基质胶和上室内的细胞 ② 染色:采用0.1%结晶紫染色
。 这种方法有如下优势:(1). 不需要固定细胞,直接染色即可。(2). 配制简单方便。(3). 染色后可以用33%醋酸脱色,将结晶紫完全洗脱下来,洗脱液可在酶标仪上570nm 测其OD值,间接...
transwell结晶紫染色
后重复用
答:
可以用这个办法处理:
先用PBS洗两次,擦去膜上层细胞,甲醇固定20min,0.1%结晶紫染色15-20min,用PBS洗掉多余的染色就好了
。结晶紫是先配成0.5%的储液,用的时候再用PBS稀释,称0.5g结晶紫,溶到100mlPBS中。0.1%结晶紫的配制:称0.1结晶紫,溶于0.1N的100mL柠檬酸溶液中,(即2、1g柠檬...
如何用transwell
进行
细胞迁移
实验
答:
小心擦尽小室里边的细胞(不能碰外边)。将小室放入装有600ml结晶紫的24孔板染色1小时
。移到空的24孔板后即可在显微镜下观察了。细胞迁移实验步骤(neuroprobe的使用方法)1.膜预处理 将48.5ml h2o +1.5ml 醋酸+150μl 鼠尾胶原置于50ml的离心管。在膜的粗糙面用铅笔做标记,放入上述溶液中4度过...
transwell
实验原理
答:
不建议做转移实验。)4、倒扣小室于吸水纸上,弃去小室内部培养基,用PBS冲洗小室 5、小室置于4%多聚甲醛((24孔板,1ml))中,固定15-20min,PBS冲洗小室 6、小室置于
结晶紫
染液(24孔板,1ml)中,
染色
15min,PBS冲洗小室 7、用棉拭子轻轻擦去小室内部非转移
细胞
,空气晾干 ...
transwell
实验
染色
后可以放多久
答:
培养24h后(侵袭实验培养48h后),每孔加入1mL4%溶液,室温固定10min;
染色
:吸去固定液,用1×PBS洗涤一次,每孔加入1mL0.5%
结晶紫
溶液,染色30min后用1×PBS洗三次,晾干;观察:用棉签小心擦去
Transwell
小室内没有
迁移的细胞
,置于200×显微镜下观察,计数每个视野中的细胞数。将小室放入培养板时...
结晶紫染色
后的
细胞
能保存多久
答:
实验前将保存在-20℃的基质胶转移至4℃冰箱融化过夜,使用前用无血清培养基按培养基:基质胶=2:1的比例稀释;接种前将24孔板和
Transwell
小室用1×PBS浸泡5min湿润小室。用胰蛋白酶消化
细胞
后,用无血清培养能保存24小时左右。
结晶紫染色
是具有超长的使用时间的,是可以过夜的,不会影响到
使用的
,此液...
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