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怎么样检测重组菌中外源基因是否表达
怎么样检测重组菌中外源基因是否表达
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推荐答案 2017-04-08
观察空质粒和外源基因的重组质粒在大肠杆菌中诱导表达后产生的蛋白带的差异,然后可以转膜后用外源基因所编码蛋白的单克隆抗体做Western-blot鉴定即可。
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相似回答
外源基因
在大肠杆菌中的诱导
表达
和
检测
的结果
如何
分析
答:
SDS-PAGE电泳后,观察空质粒和
外源基因
的
重组
质粒在大肠杆菌中诱导
表达
后产生的蛋白带的差异,然后可以转膜后用外源基因所编码蛋白的单克隆抗体做Western-blot鉴定即可。
目的
基因
的
检测
与鉴定目的基因的检测和
表达
答:
常用的方法之一是利用标记基因
,比如大肠杆菌中的具有青霉素抗性的质粒。当外源DNA与这种质粒结合形成重组质粒,并导入受体细胞后,可以通过观察受体细胞是否具有对青霉素的抗性来判断目的基因是否已被成功导入。更为关键的是,当重组DNA分子被整合到受体细胞中后,受体细胞需要展现出特定的表型特征,这表明目的...
可以用于鉴定转基因动物体基因组内
是否
整合
外源基因
的方法是...
答:
【答案】:A A项,Southern blot即DNA印迹技术,
主要用于基因组DNA的定性和定量分析,例如对基因组中特异基因的定位及检测等
,亦可用于分析重组质粒和噬菌体。B项,Northern blot即RNA印迹技术,主要用于检测某一组织或细胞中已知的特异mRNA的表达水平,也可以比较不同组织和细胞中的同一基因的表达情况。C...
目的
基因怎么检测
答:
1.可先用荧光标记,然后重组
。重组后只需查找是否发光,即为目的基因已表达成功 2.可先用同位素标记,然后重组。重组后只需检测是否有放射性,即为目的基因已表达成功 3.特殊目的基因,如:目的基因为抗抗生素基因,可加入抗生素,如细菌存活便是基因表达成功~~...
典型的DNA
重组
实验通常包括哪些步骤
答:
用人工方法使体外
重组
的DNA分子转移到受体细胞,主要是借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。目的
基因
导入受体细胞后,就可以随着受体细胞的繁殖而复制,由于细菌的繁殖速度非常快,在很短的时间内就能够获得大量的目的基因。4、目的基因的
检测
和
表达
:目的基因导入受体细胞后,是否可以稳定维持和表达其遗传特性,只有...
重组菌
不
表达
的原因有时不表达呢?
答:
我只能提点可能性哦,一、可能是你构建的
外源基因
在
表达
的时候对大肠杆菌是有毒性的,所以
菌
生长的不好,表达量会低。二、可能在转录的时候mRNA的5’端会形成比较牢固的发夹结构,所以核糖体结合不上去,表达量降低。三、可能是外源基因里面有很多对于大肠杆菌的稀有密码子,所以翻译的速度上不去,表达量...
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