重组菌不表达的原因有时不表达呢？

我构建了一株重组大肠杆菌，质粒是PET-28a，测序结果也都挺好，中间也没有突变成终止密码子，构建的别的都能表达，为什么这一株不表达呢？可能是什么原因呢？高手指点啊

推荐答案 2012-09-23

我只能提点可能性哦，一、可能是你构建的外源基因在表达的时候对大肠杆菌是有毒性的，所以菌生长的不好，表达量会低。二、可能在转录的时候mRNA的5’端会形成比较牢固的发夹结构，所以核糖体结合不上去，表达量降低。三、可能是外源基因里面有很多对于大肠杆菌的稀有密码子，所以翻译的速度上不去，表达量会低。四、不如换个质粒试一试，或者换个菌种试一试，如果表达了那就是质粒或者菌种不匹配的问题了，这种情况我遇到过一次，具体什么原因我也不知道，呵呵。最后希望对你有帮助吧

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其他回答

第1个回答 2012-09-24

可能不是不表达，而是表达量低，你没检测到；或是形成包涵体，你只检测了上清液吧

第2个回答 2012-09-24

不表达的因素很多，如ORF、密码子偏爱性等等。

先检查下密码子是否正确本回答被网友采纳

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