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提取rna，260/280才1.1，中间没什么错误，在加乙醇之后才出现的唉沉淀
如题所述
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推荐答案 2018-11-24
一般RNA都是用异丙醇沉淀的，后面用乙醇洗是为了除去前面步骤中残留的有机溶剂。理想的比值一般在1.9左右，比值偏低说明有机溶剂没洗干净，偏高则说明降解比较严重。
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②样品中含有有机溶剂(如
乙醇，
DMSO等)，强缓冲液或碱性溶液蛋白聚糖和多糖污染：
沉淀RNA的
过程中作以下改进可去除这些污染，步骤7中，每使用1mlTRIzol在水相中加0.25ml异丙醇和0.25ml高盐溶液(0.8M柠檬酸钠和1.2MNaCl)混合离心，按之前操作进行。这种方法可使蛋白聚糖和多糖留在溶液中，高效沉淀出...
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在乙醇
洗脱步骤时： 1、75％
乙醇，
4℃，7500g/min，离心5min； 2、倒掉乙醇，再加入75％乙醇，条件同上，做第二次洗脱（注意，这次EP管在离心机 里的摆放方向与第一次相反，以便能更全面的洗脱）； 3...
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RNA提取260
/230低的问题
答：
盐污染或者你试剂盒中提取液的残留，用70%
乙醇
多洗一遍。晾干再回溶。一般穗后续影响不大。
dna和
rna的260
/
280
比值有
什么
用处啊?
答：
蛋白污染会导致260和
280的
数值都下降，其净结果是260/280比值下降，但260/280的比值变化并不显著，正如分子克隆3所说。但蛋白残留会导致230的数值显著上升，显著影响260/230的比值。也就是说，如果
RNA
样品的260/280＝1.7
，260
/230＝0.5，那么就应该考虑污染原因不是胍盐残留，而是蛋白残留。
RNA的提取
方法
答：
4、异丙醇沉淀法：基本同1法，仅用二倍容积异丙醇替代
乙醇，
可去除小分子
RNA
（在异丙醇中可溶状态）5、表面活性剂快速制备法：用Triton X-100A或NP40表面活性剂破碎细胞，然后用蛋白酶K或酚去除蛋白
，乙醇沉淀
或透析。6、加热法快速制备：加热96℃-100℃，五分钟，然后离心后取上清，可用于PCR反应。
为
什么
用OD
260
/OD
280
评定核酸纯度
答：
核酸的最大吸收波长是
260
nm，这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基础。在波长260nm紫外线下，1 OD值的光密度相当于双链DNA浓度为50μg/ml；单链DNA或
RNA
为40μg/ml；寡核苷酸为20μg/ml。可以此来计算核酸样品的浓度。通过测定在260nm和
280
nm的紫外线吸收值的比值（A260/A280）可以估计核酸的...
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