做蛋白质电泳试验时蛋白样品需要稀释吗

如题所述

推荐答案 2015-01-11

蛋白质电泳实验对蛋白质样品的要求主要是蛋白质质量。太少量的蛋白质无法稳定地检测到，太多量的蛋白质无法在电泳作用下顺利地移动。样品浓度由这个质量范围与上样体积范围共同决定。上样体积太少无法准确地移液，上样体积太大则上样孔装不下。

确定了上样浓度的合适范围之后，与现有样品的浓度相比较，即知道是否需要稀释，稀释倍数多少。

举例说明，一块6.5cmx8.5cmx1.5cm polyacrylamide胶，每孔上样量可以在10-30ug之间，十孔道每孔上样体积可以在10-30ul之间。所以样品浓度可以在10ug/30ul=0.33ug/ul至30ug/10ul=3ug/ul之间。

温馨提示：答案为网友推荐，仅供参考

当前网址：http://66.wendadaohang.com/zd/DppUpDn9vU9si2snDD.html

其他回答

第1个回答推荐于2016-11-11

这要综合考虑蛋白样品的纯度，蛋白样品的浓度。
一般保证每个泳道上样的蛋白总量在5微克到10微克左右跑出来比较好看。
考虑到泳道上样最大体积可能是20微升也有可能是15微升，所以蛋白浓度要根据上样的蛋白总量除以上样体积得出的蛋白浓度来考虑是否稀释。本回答被提问者和网友采纳

相似回答

电泳实验怎样进行?答：3. 准备电泳样品：将待检测的生物分子或颗粒样品混合适量的电泳缓冲液，通常需要加入一些电泳缓冲液以进行稀释。4. 装载样品：将准备好的样品加入到电泳槽的样品槽中，通常需要使用微量移液器或者吸管进行操作。5. 开始电泳：将电泳槽连接到电源，设定适当的电压和运行时间，开始进行电泳实验。通常在较低...

蛋白质电泳问题答：我们的蛋白本身易降解，且纯化率低，蛋白浓度很低，再加上透析、除盐等复杂步骤，脆弱的蛋白又被大量稀释，那么增加初始蛋白来源不就可以了么？将原始菌液扩大好几倍，最后将蛋白进一步浓缩再跑胶，于是看到了漂亮的目的蛋白带~~~另：我不认为你的蛋白样品成分会影响电泳（除非样品含盐量过高，蛋白会跑...

中性缓冲液能对蛋白质电泳吗答：能，蛋白质溶液的应接近中性盐浓度应低于。否则必须用样品缓冲液进行大量稀释且缓冲液中的其他成分对电泳无影响

western blot详细步骤答：二、蛋白含量的测定第一步：在96孔板第一列1-8分别为浓度为0,1,2,4,6,8,9,10倍的蛋白标准液+水=10或20ml，再加上5倍稀释的考马斯亮蓝染液200ml。第二步：在96孔板后面几列依次加入稀释的蛋白样品或原液10-20ml以及5倍稀释的考马斯亮蓝染液200ml。三、电泳第一步：清洗玻璃板第二步：...

western-blot实验步骤答：使用细胞裂解液，对贴壁细胞、悬浮细胞或组织样品进行裂解。然后测定每个蛋白样品的蛋白浓度。2. 电泳(Electrophoresis)(1) SDS-PAGE凝胶配制 SDS-PAGE凝胶（分离胶及浓缩胶）可以参考一些文献资料进行配制 (2) 样品处理在收集的蛋白样品中加入适量浓缩的SDS-PAGE蛋白上样缓冲液。例如2X或5X的SDS-PAGE...

生物科研实战——Western blot答：（5）在泳道两侧加入10ug保护蛋白（即普通蛋白样本）以防止电泳时出现边缘效应（6）对应正负极盖上盖子，红对红，黑对黑（7）将电压调至80V进行电泳，气泡出现指示电泳开始，待蛋白样品电泳至下层分离胶时暂停电泳，将电压调至120V继续电泳（8）根据Marker指示，待目的蛋白电泳至分离胶三分之二处...

大家正在搜

蛋白质电泳实验蛋白质电泳实验报告电泳样品有的样品没跑出来蛋白电泳样品处理蛋白电泳样品跑不直蛋白质电泳蛋白质电泳方法蛋白质电泳原理蛋白质电泳图解