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菌液加热可以裂解出DNA吗
...不会死亡.这是为什么,它的蛋白质虽然变性,但是还有
dna
,还
可以
...
答:
不是所有的酶都是蛋白质,还有RNA酶,但是这里产生毒的是蛋白酶
提取核酸时,加入蛋白酶后为什么要
加热
到65摄氏度
答:
⑵方法 ①取单菌落接种于5mlLB培养液中,37℃振荡培养过夜.(使用试管)②将上述
菌液
接种于200mlLB培养液中,37℃振荡培养过夜.(使用500ml或1000ml三角瓶)③离心,收集沉淀(5000r/m,10分钟)④将沉淀悬浮于20ml 20倍SSC缓冲液中,混匀.⑤加入200mg SDS,室温下振荡过夜,使细菌细胞充分裂解,
裂解液
呈...
碱
裂解
法原理
答:
在
裂解
过程中,细菌蛋白质、破裂的细胞壁和变性的染色体
DNA
会相互缠绕成大型复合物,后者被十二烷基硫酸盐包盖。当用K+取代Na+时,复合物会从
溶液
中有效地沉淀下来,离心除去变性剂后,就可以从上清中回收复性的质粒DNA。在SDS存在的条件下,碱水解是一项非常灵活的技术,它对E. coli的所有菌株都适用,...
细菌在细胞
裂解液
里长时间放置对细
菌DNA
的提取有影响么?
答:
细胞
裂解液
含有的成分主要是用来
裂解细菌
细胞壁和细胞膜的酶,应该没法降解
DNA
之类的核糖,所以……没影响那是应该的。
动物尸体被煮熟后还
可以
提取
DNA吗
答:
动物尸体被煮熟后不可以提取
DNA
。DNA提取原则:1、保证核酸一级结构的完整性;2、核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子;3、其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染应降低到最低程度;4、其他核酸分子,如RNA,也应尽量去除。蛋白质由氢键和范德华力共同维系,并受...
质粒
DNA
提取时,
菌
体DNA要如何去除
答:
①差速离心,可以将两种DNA分离 ②凝胶电泳,分离开两种DNA后,将迁移最慢的条带(染色体DNA)剪下,用洗脱
液
洗脱下来.③碱变性
裂解
法,细菌悬浮液在高碱性条件下,染色体和蛋白质变性,质粒DNA由于其超螺旋共价闭合结构,双链不会分离,再以PH4.8的高盐缓冲液调节其PH至中性,质粒
DNA可
再度复性,其速度比...
RNA的提取方法
答:
3、玻璃棒缠绕法:用盐酸胍
裂解
细胞,将裂解物铺于乙醇上,然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅,
DNA
沉淀
液
绕于玻棒。生成DNA约80kb。4、异丙醇沉淀法:基本同1法,仅用二倍容积异丙醇替代乙醇,可去除小分子RNA(在异丙醇中可溶状态)5、表面活性剂快速制备法:用Triton X-100A或NP40表面活性剂破碎...
菌液
怎么长途运输而对总
DNA
提取不会影响?
答:
这个问题好纠结,在我看来有4个选择:把菌种发过去,摇菌提取;你直接把
DNA
提了,发过去;离心把菌收了,用冰盒加干冰发过去;如果非要发新鲜
菌液
,用冰盒放冰袋发过去呗,现在的天气加上冰袋,3-5天是完全没问题的。
DNA
的鉴定
能
水浴
加热吗
?
答:
酒精(酒精和氯化钠起提取作用)95%(体积分数)除杂以提纯
DNA
,DNA不溶于酒精,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精
溶液
二苯胺(二苯胺起鉴定作用,C项漏了二苯胺)DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色
真菌鉴定菌种,
可以
不提取
DNA
,直接用菌丝做PCR吗?
答:
这个是因为大肠杆菌是杆菌属于原核生物(细胞壁是由肽聚糖组成的细胞壁,且没有细胞核),很容易破裂而且在做PCR的时加的缓冲
液
下破裂后遗传物质就
出来
了就可以做模板了(但是浓度不高 所以在做菌落PCR时加的模板就比较多),而酵母
菌
是真核生物(有含甲壳素为主要成分的细胞壁,且有细胞核),酵母...
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