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电泳缓冲液的配制
核酸的琼脂糖凝胶电泳为什么要用
电泳缓冲液配制
凝胶
答:
主要的原因是保持琼脂凝胶和周围的
缓冲
体系保持相同的pH值,当然这种pH值是前人优化过的,最有利于核酸分离和稳定的pH条件;如果凝胶和缓冲体系的pH存在较大的差异,势必会影响核酸的分离效果。
血清蛋白
电泳
时,为什么要把上层电泳槽接在负极上
答:
2.样品
配制
正常入血清0.3ml,加入样品稀释液1.7ml,轻摇混匀。3.电泳(1)将上述制备好的凝胶管分别插入上电泳槽的橡胶塞孔中,高出槽底。(2)下电泳槽加入10倍稀释的
电泳缓冲液
,随后放入带凝胶管的上电泳槽。(3)加样:用微量注射器取样品液加30μl ,沿管壁慢慢加在浓缩胶面上,再用缓冲液沿管壁缓慢加在样品...
电泳
胶板
怎么
做
答:
5 琼脂糖凝胶凝固后,在室温放置20min,小心拔掉点样梳子和电泳胶模两端的挡板,保持点样孔的完好;6 将电泳胶模放入电泳槽中,加入
电泳缓冲液
,使电泳缓冲液面高出琼脂糖凝胶表面1~2mm。如点样孔内有气泡,用吸管小心吸出,以免影响加样;7 将10μl DNA样品与2μl体积的溴酚蓝指示剂点样缓冲...
电泳缓冲液的
作用?
答:
缓冲液在电泳过程中的一个作用是维持合适的pH。电泳时正极与负极都会发生电解反应,正极发生的是氧化反应(4OH--4e->2H2O+O2),负极发生的是还原反应(4H++4e->2H2),长时间的电泳将使正极变酸,负极变碱。一个好的缓冲系统应有较强的缓冲能力,是溶液两极的pH保持基本不变。
电泳缓冲液的
另一个...
为什么甘氨酸在聚酰胺中跑得快一些
答:
A:主要出现在蛋白质垂直电泳槽中,一般是两板之间的底部间隙气泡未排除干净。 处理办法:可在两板间加入适量缓冲液,以排除气泡。 Q:为什么带出现拖尾现象? A:主要是样品融解效果不佳或分离胶浓度过大引起的。 处理办法:加样前离心;选择适当的样品缓冲液,加适量样品促溶剂;
电泳缓冲液
时间过长,重新
配制
;降低凝胶浓度...
实验室需要做RNA
电泳
实验,采用的
缓冲液
哪一种比较合适呢?
答:
我们这边RNA电泳用的是的Mops缓冲剂,也就是3-(N吗啡啉)丙磺酸,属于生物缓冲剂,经常用于配置RNA
电泳缓冲液
。我们这边一直用新德晟的,一直很稳定。当然不同的试验用哪一种你需要去咨询一下
配置TAE
缓冲液
时,是用氢氧化钠调它的PH吗?
答:
非也,NaOH这么强的碱性是做不了buffer solution的 提供两种方法 1.50×Tris-乙酸(TAE)
缓冲液
成分及终浓度
配制
1L溶液各成分的用量 2mol/L Tris碱 1mol/L 乙酸 100 mmol/L EDTA 水 242g 57.1 ml的冰乙酸(17.4 mol/L)200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0)补足1L 2.5×Tris-硼酸(...
转膜液和
电泳液
可以混用吗
答:
可以。转膜液和
电泳液
可以混用。转膜缓冲液跟电泳缓冲液一般可以回收重复利用(大约三次),一般回收的电泳液加入垂直电泳槽的下半部分,上半部分最好使用新鲜
配制的电泳缓冲液
,但重复利用这些缓冲液会降低缓冲效率,故转膜缓冲液跟电泳液最好不要重复利用,建议配其储液,用时稀释即可。
常用的
电泳缓冲液
有哪些,简述它们的优缺点。
答:
常用的
电泳缓冲液
有Tris-醋酸(TAE)、Tris-硼酸(TBE)、Tris-磷酸(TPE)三种。TAE的缓冲能力低于其它二种,长时间电泳会导致电泳槽阴极变为碱性,阳极变为酸性,使缓冲能力丧失殆尽,所以TAE电泳需在两个电泳槽之间使用蠕动泵进行循环,且需时常更新。TBE与TPE均具有较高的缓冲能力。但用TPE
配制
的凝胶,...
pH12.5 硼酸
缓冲液如何配制
?
答:
(5)盐
缓冲液的配制
a、M/20硼砂(10.108克Na2B4O7·10H2O溶在一升水中)b、M/5硼酸+M/20NaCl(12.45克H2BO+2.925克)NaCl在一升水中(见下表)pHa(ml)b(ml)pHa(ml)b(ml)7.00.459.558.23.56.57.20.759.258.44.455.557.31.108.98.65.54.57.82.057.959.08.21.88.02....
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