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提rna需要多少细胞
2020-08-24质粒构建
答:
注意:若柱子放置较久,
需要
进行这一步骤;否则,可省。 3、向留有菌体沉淀的离心管中加入500μl溶液P1(请先检查是否已加入
RNa
seA,并置于冰上 ) ,使用移液器或涡旋振荡器彻底悬浮细菌
细胞
沉淀,并移至2ml离心管中。如果沉淀的菌体较多,则相应增加P1的用量(之后P2和P3的用量也应成比例增加),并分到几个管子中分...
基因组DNA
提取
中
细胞
裂解液怎么配制
答:
主要是裂解液处理法,
细胞
裂解液的主要目的有以下几种:(1)利用去污剂破坏脂质双分子层,破裂细胞;(2)溶解蛋白;(3)蛋白变性使其稳定;(4)抑制蛋白酶活性.主要根据不同的目的,裂解液的组成有所不同,主要有提取核酸和蛋白两中.在
提取RNA
或DNA时,我们主要是要充分裂解细胞,得到更多的核酸;如果...
胞水平进行WB和RT-PCR所
需多少细胞
,一般用多大的板子培...
答:
胞水平进行WB和RT-PCR所
需多少细胞
,一般用多大的板子培...:whole blood 全血(即未经任何方式分部分离的血液)Western Blot,“Western免疫印迹法”。是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。RT-PCR...
用TRizol试剂提悬浮
细胞
的
RNA
,操作都是按照说明进行的,电泳检测只有一...
答:
被污染了吧~
RNA提取
超容易被污染的。确定试剂没问题~严格把关所有的器材消毒灭菌,换一个地方做一做试试看~有时候整个房间可能都会被污染的。
质粒瞬时转染
细胞
后多久可以
提rna
答:
一般为24-48小时。建议你做个rt-pcr时间梯度,检测下哪个时间收
rna
效果最好。
准备
提rna
的组织可以放在trizo里吗l
答:
应当是Trizol吧 Trizol是由酚与异硫氰酸胍组成的均相溶液。主要用途是
提取rna
TRIZOL试剂是直接从
细胞
或组织中提取总RNA的试剂。
肿瘤
细胞
收集后后可否-80℃保存用于
RNA提取
?
答:
可以 其实直接泡在trizol里面放-80就行了
多聚甲醛固定后可
提rna
吗
答:
不可。多聚甲醛是一种强烈的交联剂,可以将
细胞
和组织中的蛋白质与核酸交联在一起。这种交联作用对于保持细胞和组织的结构完整性非常重要,但同时也使
rna
不可
提取
和纯化。
求生物高手指点,做DNA、
RNA提取
实验时提取的基因组DNA有降解,如何解决...
答:
在实验过程中注意加入EDTA,因为它是DNA的酶抑制剂,DNA在变性后,可以防止DNA被降解。在加入碱性溶液破碎
细胞
后,摇动离心管一定
要
温和,不能振荡,尽可能上下颠倒混。并且要注意时间间隔做下一步不要太长,这时候也可能破坏了DNA,使其降解,所以一定要把握好时间。
浓盐法
提取
的
RNA
还有生物学活性吗
答:
稀减法提取的RNA具有生物活性。工业上常用稀碱法和浓盐法
提取RNA
,所提取的核酸均为变性的RNA。核酸是遗传信息的携带者,是生命的最基本物质,它和蛋白质是构成生物体的主要成分。按化学组成可以将核酸分成两大类:含脱氧核糖核酸(dna),主要存在于
细胞
核中;含核糖核酸(rna),主要存在于细胞质内。...
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