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荧光素酶报告基因实验分组
荧光素酶报告基因
检测
答:
4、荧光检测: 使用酶标仪或具有类似检测功能的设备进行荧光强度检测 5、数据分析
实验
案例:CDK9是miR-206的靶标(a),但是CDK9突变型不是miR-206的靶标(b)。通过构建出
荧光素酶报告
载体,将荧光素酶与CDK9
基因
连接(b),然后转染到细胞内进行检测。结果表明,miR-206 inhibitor显著的提高了WT-CDK9...
荧光素酶报告基因实验
答:
在荧光素酶报告系统中,只使用一种荧光素酶(一般为荧火虫荧光素酶),为单
荧光素酶报告实验
;由于不同的荧光素酶所发出的光具有不同的光谱性质,或使用不同的底物,一个报告实验中也可以使用两种或多种荧光素酶,其中最常用到的就是双荧光素酶(一般为荧火虫荧光素酶和海肾荧光素酶)报告实验,...
luciferase
实验
luciferase实验原理
答:
1、应用原理转录因子是一种具有特殊结构、行使调控基因表达功能的蛋白质分子,也称为反式作用因子。2、某些转录因子仅与其靶启动子中的特异序列结合,这些特异性的序列被称为顺式作用元件,转录因子的DNA结合域和顺式作用元件实现共价结合,从而对基因的表达起抑制或增强的作用。3、
荧光素酶报告基因实验
(...
双
荧光素酶报告基因
检测
实验
技术服务
答:
Luciferase
报告基因
系统是以 荧光素(luciferin) 为底物来检测 萤火虫
荧光素酶
(fireflyluciferase)活性的
实验
。荧光素底物会在荧光素酶作用下会发光(波长540-600nm),且光强能反应荧光素酶的表达量。荧光素酶的蛋白表达量与启动子活性、mRNA的稳定性及翻译效率相关。从而将待测启动子、UTR等序列与荧光素酶ORF框融合表...
双
荧光素酶实验
验证启动子活性需要几个质粒
答:
双
荧光素酶实验
验证启动子活性需要几个质粒:双荧光素酶实验验证启动子活性需要3个质粒。
荧光素酶报告基因
技术流程
答:
荧光素酶报告基因
技术的流程如下:首先,通过生物信息学手段,对启动子区域进行深入分析,预测潜在的转录因子结合位点,以确定合适的基因片段。接着,利用PCR技术从基因组DNA中精确克隆所需的启动子片段,然后将其整合到荧光素酶报告基因质粒(pGL3-basic)中,形成重组质粒。完成重组后,对克隆进行筛选并进行...
什么是luciferase
报告基因
系统?
答:
荧光素酶报告基因实验
(luciferase assay)是检测这类转录因子和其靶启动子中的特异顺序结合的重要手段。其原理简述如下:(1)构建一个将靶启动子的特定片段插入到荧光素酶表达序列前方的报告基因质粒,如pGL3-basic等。(2) 将要检测的转录因子表达质粒与报告基因质粒共转染293细胞或其它相关的细胞系。
求助怎么做
荧光素酶报告基因实验
答:
怎么做
荧光素酶报告基因实验
(1) 用生物信息学方法分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点。(2)设计引物用PCR法从基因组DNA中克隆所需的靶启动子片段,将此片段插入到荧光素酶报告基因质粒(pGL3-basic)中。(3)筛选阳性克隆,测序。扩增克隆并提纯质粒备用。(4) 扩增转录因子质粒,提纯备用...
双
荧光素酶报告基因实验
原理
答:
双
荧光素酶报告基因实验
原理具体如下:双荧光素酶报告基因实验原理是利用双荧光素酶作为荧光素酶的标记来研究基因表达与调控的机制。双荧光素酶报告基因实验是一种基因表达定量分析技术,通过将双荧光素酶Luciferase作为报告基因插入到需要研究的靶基因启动子区域或转录后区域,使其与靶基因协同表达。当荧光素...
荧光素酶报告基因
的发展
答:
双
荧光素酶报告基因
测试∶ 结合萤火虫和海洋腔肠荧光素酶先进的共报告基因测试技术在用萤火虫荧光素酶定量基因表达时, 通常采用第二个报告基因来减少
实验
的变化因素。但传统的共报告基因(比如CAT,β-Gal, GUS)不够便利,因为各自的测试化学,处理要求检测特点存在差异。Promega提供一种先进的双报告基因技术,...
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