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细胞提取rna需要多少细胞
提取
总
RNA
,最少
需要多少
培养的
细胞
答:
用Trizol来提取细胞总RNA的话,
一个6孔板的细胞足够了
。对于贴壁培养的细胞,可将培养基吸出后直接向培养板中加入Trizol来溶解细胞,然后分次移出细胞裂解物进行后续操作即可。值得注意的是,对于所加Trizol的量,是依据培养板的面积而不是依据细胞的数量来决定用量的(一般每10cm2加1 ml)。当Trizol量...
提rna
的时候每个孔里的
细胞
数量可以不统一吗
答:
提rna
的时候每个孔里的
细胞
数量可以不统一的。根据查询丁香试验,一般都是每个孔保证有10的7次方个细胞就可以了。所以提rna的时候每个孔里的细胞数量可以不统一的。细胞是生物体结构和功能的基本单位,是制造蛋白质、化学物质和信号的生物机器,负责我们体内发生的一切。科学家认为它们是最小的生命形式,是...
RT-PCR
需要
多大的
细胞
量及操作步骤
答:
理论上50个cell就可以
,但是实际操作中我只看到过牛人从100个cell里面提出来过(用LCM逮的),自己提弄过1000cell的。没有用kit。不同点是用BCP代替氯仿,并且加糖原助沉淀,具体的好处不是很清楚,但是BCP用量小,而且在cell少的情况下,使用糖原可以尽量的降低误操作。由于细胞的大小,RNA量以及你作...
提取
血液的
RNA
怎么提取
答:
每100-200μl血液收集的白
细胞
沉淀加入1ml TRIzol。室温放置5min,使样品充分裂解。4℃12,000 rpm 离心10分钟,取上清()。每1ml TRIzol加入200μl氯仿,剧烈振荡混匀后室温放置3-5 min,自然分相。4℃ 12,000rpm离心10-15min。样品会分成三层:黄色的有机相,中间层和无色的水相,
RNA
主要在...
10^6个
细胞
能
提多少
微克
rna
答:
细胞
量在105-106,用的biog法
提取
的,得到差不多40微克 1. 加入200μL裂解液,20 μL 消化液,充分振荡混匀,56℃水浴10 分钟至细胞完全裂解。2. 加入500μL析出液,轻轻颠倒混匀,如有半透明悬浮物,不影响
RNA
的提取与后续实验。3. 将吸附柱放入收集管内,将上述溶液转入吸附柱内,...
rtpcr
需要多少
个
细胞
的
rna
答:
朋友你好!如果用293T
细胞
那么12孔板一个孔的细胞量就够,但293T属于细胞个体小且长得比较密比较多的那种,如果换做HeLa或者更大更稀的其他细胞,那还是6孔板或者35mm小皿更保险。总之你
提
完
RNA要
测浓度,如果出现低于标准范围或平行孔之间/处理与对照之间相差过大,就说明你细胞量太少或操作有问题,...
用trizol法
提取RNA
的方法及每一步的原理.
答:
1. 提取组织RNA时,每50~100mg组织用1ml Trizol试剂对组织进行裂解:
提取细胞RNA
时,先离心沉淀细胞,每5~106个细胞加1ml Trizol后,反复用枪吹打或剧烈震荡以裂解细胞;2. 将上述组织或细胞的Trizol裂解液转入EP管中,在试问15~30℃下放置5分钟;3. 在上述EP管中,按照每1mlTrizol后加0.2ml氯仿...
动物
RNA
的
提取
答:
RNA
的
提取
一、准备试剂:氯仿,异丙醇,75℅乙醇,无RNase的水或0.5℅SDS(溶液均需用DEPC处理过的水配制)。二、操作步骤:1. 匀浆处理:a. 组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。b. 单层培养
细胞
直接在培养板中...
细胞提取RNA
求助
答:
2-8℃ 12000 rpm离心10分钟。
RNA
主要在上层无色的水相中,把水相转移到新管中,不要吸到沉淀。吸附柱前处理:在吸附柱中加入500ul 洗柱液,室温放置2分钟,2-8℃ 12,000 rpm离心2min,弃废液。6. 第4步收集的上清中加入200ul无水乙醇混匀,加入吸附柱静置2分钟,2-8℃ 12000rpm离心2min,弃...
如何从血清中
提取RNA
答:
血液(全血,也就医学上说的外周血)中RNA的含量很低,1ml一般在3ug左右(1-7ug)。一般是处理抗凝血液。像以上全血的
RNA提取
有两种思路:1)直接处理抗凝的全血,即加入如Trizol的裂解液直接往下做。此方法有个缺点:处理的体积血液体积有限,一般1ml Trizol处理100ul血液,最多不超过200ul.2) 先...
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