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提rna需要多少组织细胞量
Trizol 法怎么
提取
高质量
RNA
答:
1. 从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀
。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。2. 匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一...
用trizol法
提取RNA
的方法及每一步的原理.
答:
1. 提取组织RNA时,
每50~100mg组织用1ml
Trizol试剂对组织进行裂解:提取细胞RNA时,先离心沉淀细胞,每5~106个细胞加1ml Trizol后,反复用枪吹打或剧烈震荡以裂解细胞;2. 将上述组织或细胞的Trizol裂解液转入EP管中,在试问15~30℃下放置5分钟;3. 在上述EP管中,按照每1mlTrizol后加0.2ml氯仿...
TRIZOL基本特点
答:
TRIZOL试剂是一种高效且广泛应用的总
RNA提取
工具,适用于各种生物样本,包括人、动物、植物和细菌。无论
组织
大小,从50-100毫克的微小样本到1克以上的大量组织,甚至
细胞数量
在5×106至107的范围,TRIZOL都能提供出色的分离效果。其操作简便,能够在一小时内处理多个样品,极大地节省了时间。TRIZOL提取的总...
提取RNA
相关
答:
--自己的一些经验-- 之前都是在
提细胞
的
RNA
,用量一般是细胞瓶/6孔板的一个孔用1ml,12/24孔板用0.5。 彩艳姐的意思是,这个用量是足够多的,一般就按照这个量来加就可以了。后续异丙醇等按照trizol的用量来加。 操作过程中都是无酶的用具,冰上操作。看完了丁香师兄的protocol和经验...
求助
RNA提取
答:
b:样品匀浆时加地试剂量太少 c:匀浆后样品未在室温放置2分钟 d:水相中混有有机相 e:最后得到地
RNA
沉淀未完全溶解 3.RNA降解原因 a:
组织
取出后没有马上处理或冷冻 b:样品或
提取
地RNA沉淀保存于-5--20度,未在-60--70度保存 c:
细胞
在胰酶处理时被破坏 d:溶液或离心管未经RBase去处理 ...
求TRIZOL
提取RNA
的详细步骤
答:
1、在
提取组织RNA
时,每50~100mg组织用1ml Trizol试剂对组织进行裂解;
提取细胞RNA
时,先离心沉淀细胞,每5-10 ╳106个细胞加1ml Trizol后,反复用枪吹打或剧烈振荡以裂解细胞。2、将组织或细胞的Trizol裂解液转入EP管中,在室温15~30C下放置5分钟;在EP管中,按照每1ml TRIZOL加0.2ml氯仿的量...
提取RNA
为什么选幼嫩
答:
1.从少量样品(
1-10mg组织或102-104细胞
)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个...
提rna
步骤及原理结果分析
答:
Trizol的Protocol,提供了一个简单的比例,1ml裂解液可以用于50-100mg
组织
或5-10X106个
细胞
;我的建议是,样品量绝对要小于资料所提供的。起始样品用多大,并没有具体的说法。如果不是样品量有限,则以能抽提出满足数次成功实验所需的
RNA
,作为决定样品起始量的基础,会比较合理的。不要因为1ml裂解液...
手把手教学——
RNA提取
的实验步骤&注意事项
答:
实验操作指南首先,确保
组织
在液氮中冷冻并研磨,然后根据样品量选择FreeZol(500μL裂解50mg组织)或TRIzol(均匀裂解)。悬浮
细胞
或贴壁细胞分别处理,前者离心后直接加入裂解剂,后者需清洗并用裂解剂吹打脱落。TRIzol法使用TRIzol裂解组织,加入氯仿后轻轻摇匀,静置4°C分层。注意氯仿可能带来的DNA污染,...
细胞提取RNA
求助
答:
b. 动物
组织
:取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1ml裂解液,用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理。c. 贴壁
细胞
:直接在培养板中加入裂解液裂解细胞,每106细胞加1ml 裂解液。用取样器吹打混匀。d. 细胞悬液:离心收集细胞。每106动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加1ml裂解液混匀。e. 血液处理:取0.2...
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