制备良好的动物染色体标本应注意哪些问题?为什么?

Question

如题所述

Answer 1

1)
动物
的选择,一般用
小鼠
,其繁殖能力强,易于饲养.我们常用的是它们的
骨髓细胞
和
精巢
,因其分裂指数较高,不用
体外
培养就可以得到
分裂中期
的细胞.
2)秋水仙素用量要注意,太多或处理时间过长，会导致
染色体
的过分凝缩或
着丝点
裂解，最终会引起染色体形态不正常，甚至被破坏或溶解。
3)
低渗处理很关键。低渗液的量、处理时间均与细胞的数量有关。低渗过度，细胞会破裂；低渗不足则染色体
在一起
，分散不开。
4)
离心速度或
离心时间
也能影响染色体
标本
的制备。离心速度过大或离心时间过长，则会引起细胞破裂；反之，离心速度过小或离心时间过短，则细胞沉降不下来，则会引起大量细胞的丢失。
5)
固定液要随用随配，固定彻底后再打散细胞
团块
，否则细胞容易破碎，染色体分散亦受到影响。
6)
载玻片要预冷.冷却不够，则会影响染色体的附着和铺展。
7)
用吸管吹散细胞时用力必须尽量轻柔，用力过大则会造成细胞破裂，而染色体也会弥散在
溶液
中，在随后的离心中将会丢失。
8)
滴片时的高度很重要，高度过低细胞不会破裂；过高则染色体过于分散甚至丢失，无法辨别出染色体的准确数量。