培养基，培养器皿和植物材料通常怎样灭菌

Question

如题所述

Answer 1

培养基、培养器皿和植物材料的灭菌是植物组织培养中关键的步骤，以确保实验的无菌条件。以下是各种灭菌方法的详细说明：
1. 物理灭菌方法：
- 干热灭菌：适用于玻璃器皿及耐热用具，如烘箱加热至160-180℃，维持90分钟。
- 湿热灭菌：常用于培养基，通过高压蒸汽在121℃下维持20-30分钟。
- 射线处理：利用紫外线、超声波、微波等射线杀灭微生物。
- 过滤：对于不耐热的物质，如某些生长调节剂，通过过滤除菌。
2. 化学灭菌方法：
- 使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、漂白粉、次氯酸钠等化学药品处理。
在无菌操作中，还需要注意以下几点：
- 器械灼烧灭菌：剪刀、镊子等在酒精灯火焰上灼烧。
- 空间灭菌：采用紫外线或熏蒸方法，如甲醛或冰醋酸。
- 表面灭菌：对植物材料表面进行清洗和消毒处理。
灭菌过程中，要注意各种药剂的浓度和作用时间，以确保灭菌效果同时不损伤植物材料。例如，使用70%酒精进行初步消毒，随后根据材料特性选择合适的消毒剂，如氯化汞、漂白粉、次氯酸钙等，并按照推荐浓度和时间进行处理。
最后，通过无菌水漂洗，去除残留在植物材料上的消毒剂，减少对植物细胞的伤害。在整个灭菌过程中，保持无菌操作，避免污染，是确保实验成功的关键。