荧光定量PCR（qPCR）是一种广泛应用于生命科学研究和医学诊断的分子生物学技术。它结合了PCR技术和荧光检测技术，能够快速、准确地检测出目标DNA或RNA分子的数量，因此在病原体检测、基因表达分析、遗传疾病诊断等领域得到了广泛应用。
基本原理
qPCR技术基于PCR技术，但是在PCR的基础上加入了荧光染料和检测系统。PCR是一种体外扩增DNA的技术，它通过反复复制DNA模板，使其数量呈指数级增长。qPCR在PCR反应过程中，通过荧光染料与目标分子结合，利用荧光检测系统测量荧光信号的强度，从而实现定量检测。
操作步骤
1.样品准备：将待检测样品中的DNA或RNA提取出来，并进行纯化和浓缩。
2.试剂制备：制备PCR反应体系所需的试剂，包括PCR反应缓冲液、酶、荧光探针等。
3.PCR反应：将样品中的DNA或RNA与PCR反应体系中的试剂混合，进行PCR反应。反应过程中，荧光探针与目标分子结合，发出荧光信号。
4.荧光检测：利用荧光检测系统检测PCR反应产生的荧光信号，根据荧光信号强度计算出目标分子的数量。
应用领域
1.病原体检测：qPCR技术可以检测出各种病原体的DNA或RNA，如病毒、细菌、真菌等，因此在临床医学中得到了广泛应用。
2.基因表达分析：qPCR可以检测出基因的表达水平，从而研究基因的功能和调控机制，因此在生命科学研究中得到了广泛应用。
3.遗传疾病诊断：qPCR可以检测出某些遗传疾病的基因突变，从而进行早期诊断和预防。