蛋白质、核酸等生物大分子为何能用离子交换色谱分离?

如题所述

蛋白质、核酸等生物大分子都带有多个带电荷基团,同时伴随复杂的空间结构,因此会表现出在不同pH环境下带不同电荷的表观现象。以蛋白质为例,蛋白质有多个氨基酸组合而成,而氨基酸本身带有氨基和羧基,二者在不同的pH环境下可带正、负电荷,这就导致了氨基酸在不同pH环境下带不同的电荷。人们根据生物大分子在不同的环境下带电荷不同设计了离子交换来分离该大分子。当然这只是分离的一种手段,一般来说分离生物大分子会利用多种分子特性如疏水性等设计一系列分离方案,来得到纯度较高的生物大分子。
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第1个回答  2013-01-06
离子交换色谱中的固定相是一些带电荷的基团, 这些带电基团通过静电相互作用与带相反电荷的离子结合。如果流动相中存在其他带相反电荷的离子,按照质量作用定律,这些离子将与结合在固定相上的反离子进行交换。固定相基团带正电荷的时候,其可交换离子为阴离子,这种离子交换剂为阴离子交换剂;固定相的带电基团带负电荷,可用来与流动相交换的离子就是阳离子,这种离子交换剂叫做阳离子交换剂。阴离子交换柱的功能团主要是-NH2,及-NH3 :阳离子交换剂的功能团主要是-SO3H及-COOH。其中-NH3 离子交换柱及-SO3H离子交换剂属于强离子交换剂,它们在很广泛的pH范围内都有离子交换能力;-NH2及-COOH 离子交换柱属于弱离子交换剂,只有在一定的pH值范围内,才能有离子交换能力。
离子交换色谱主要用于可电离化合物的分离,而蛋白质、核酸在一定pH的缓冲液中,也是带有电荷的(pH大于等电点带负电,可以用阴离子交换色谱;反之,用阳离子交换色谱)。
第2个回答  2013-01-04
因为他们都带电荷啊,因为你柱子上有相反的离子啊,他们可以通过离子键相互作用啊!
同时的柱子有孔径啊,可以将小的直接溜走,没有机会结合啊
可以让大的下来的更慢啊!

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第3个回答  2013-01-05
因为其大小不同在相同的电荷下,游离的速度也不同,所以就可以将其分开!!
第4个回答  2013-01-05
因为蛋白质与核酸等大分子都有带电基团
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