感受态细菌转化时需要多大的质粒浓度?

如题所述

100-500ng/uL。质粒转化不少于10的5次方,连接产物不少于10的6次方。

两种质粒是可以同时进入同一个感受态细胞的,比如构建腺病毒载体时。但是要求两种质粒进入同一个感受态细胞,转化效率非常低,一般需要电转或者其他的特殊处理。增加收菌次数,相对提高了质粒的量,这样的话裂解液的量可以适当增加;裂解要充分,变性和复性按说明应该是不超过5分钟,合理控制时间。

扩展资料:

肺炎双球菌RⅡ型无毒株和加热至60℃被杀死的SⅢ型有毒株,混合注射至小鼠体内,结果在小鼠体内出现了生活的SⅢ型有毒株,使小鼠患病死亡。

并且这种具荚膜的有毒株能世代相传保持其特性。细菌转化现象最初由英国细菌学家格里菲斯(F.Griffith)于1928年发现,直至1944年美国科学家埃弗里(O.T.Avery)等人才证实了转化因子是脱氧核糖核酸,从而为遗传学的发展作出了重大贡献。

参考资料来源:百度百科-细菌转化

参考资料来源:百度百科-质粒

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第1个回答  2012-12-02
一般来说10~100ng都可以,不过其实我们真正做的时候就是不管浓度多大(浓度约在100ng/ul以上),都是取1ul的质粒溶液,稀释10倍,就是10ul,加入到100ul的感受态细胞里~每次都这样做,没有问题本回答被提问者采纳
第2个回答  推荐于2017-12-15
质粒还是连接产物 质粒的话随便一点点就可以了 多大浓度的都加1ul吧本回答被网友采纳
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