100-500ng/uL。质粒转化不少于10的5次方,连接产物不少于10的6次方。
两种质粒是可以同时进入同一个感受态细胞的,比如构建腺病毒载体时。但是要求两种质粒进入同一个感受态细胞,转化效率非常低,一般需要电转或者其他的特殊处理。增加收菌次数,相对提高了质粒的量,这样的话裂解液的量可以适当增加;裂解要充分,变性和复性按说明应该是不超过5分钟,合理控制时间。
扩展资料:
把肺炎双球菌RⅡ型无毒株和加热至60℃被杀死的SⅢ型有毒株,混合注射至小鼠体内,结果在小鼠体内出现了生活的SⅢ型有毒株,使小鼠患病死亡。
并且这种具荚膜的有毒株能世代相传保持其特性。细菌转化现象最初由英国细菌学家格里菲斯(F.Griffith)于1928年发现,直至1944年美国科学家埃弗里(O.T.Avery)等人才证实了转化因子是脱氧核糖核酸,从而为遗传学的发展作出了重大贡献。
参考资料来源:百度百科-细菌转化
参考资料来源:百度百科-质粒