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求助做transwell时结晶紫染色的具体详细步骤
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第1个回答 2022-09-05
1用棉签擦去基质:采用0.1%结晶紫染色。这种方法有如固定细胞,直接染色即可。(2).配制简单方便。(3).染色后可以用33%醋酸脱色,将结晶紫完全洗脱下来,洗脱液可在酶标仪上570nm测其OD值,间接...
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求助做transwell时结晶紫染色的具体详细步骤
答:
① 用棉签擦去基质胶和上室内的细胞 ② 染色:采用0.1%结晶紫染色
。 这种方法有如下优势:(1). 不需要固定细胞,直接染色即可。(2). 配制简单方便。(3). 染色后可以用33%醋酸脱色,将结晶紫完全洗脱下来,洗脱液可在酶标仪上570nm 测其OD值,间接...
Transwell
细胞迁移实验
答:
1、Transwell法的步骤:先把小室擦干净后在超净工作台照紫外过夜
。2、如新的小室省略此步。3、下一步将小室倒扣并小室的底部外侧滴加0.1%(还是1%记不清了)的明胶室温放置20-30分钟。4、这是将细胞消化下来,调浓度。5、拿出24孔板加600ml的含有刺激因子的培养基。6、小室上还未干的明胶甩掉,...
transwell
实验原理
答:
实验
步骤
:1、消化细胞,制备无血清细胞悬浮液,计数,加入细胞悬液100ul,接种细胞105/孔。2、24孔板(下室)加入600ul含10%胎牛血清培养基,将小室置于24孔板中,上室加100ul无血清培养基悬浮
的
细胞。3、37℃培养一段时间(24h、36h、48h,若48小时后仅转移零星细胞,不建议做转移实验。)4、倒...
transwell结晶紫染色
后重复用
答:
可以用这个办法处理:
先用PBS洗两次,擦去膜上层细胞,甲醇固定20min,0.1%结晶紫染色15-20min,用PBS洗掉多余的染色就好了
。结晶紫是先配成0.5%的储液,用的时候再用PBS稀释,称0.5g结晶紫,溶到100mlPBS中。0.1%结晶紫的配制:称0.1结晶紫,溶于0.1N的100mL柠檬酸溶液中,(即2、1g柠檬...
transwell
用多少浓度bsa悬浮细胞
答:
1.膜预处理 48.5ml H2O +1移空24孔板即显微镜观察.5ml 醋酸+150μL 鼠尾胶原置于50ml离管装塑料垫. 固定 膜取细胞消化室放入装600ml
结晶紫
24孔板
染色
1调浓度拿24孔板加600ml含刺激培养基 3加细胞放入24孔板放入细胞培养箱培养4-6室膜粗糙面用铅笔做标记放入述溶液4度夜 实验前膜取放入装PBS...
transwell
实验
染色
后可以放多久
答:
培养24h后(侵袭实验培养48h后),每孔加入1mL4%溶液,室温固定10min;
染色
:吸去固定液,用1×PBS洗涤一次,每孔加入1mL0.5%
结晶紫
溶液,染色30min后用1×PBS洗三次,晾干;观察:用棉签小心擦去
Transwell
小室内没有迁移的细胞,置于200×显微镜下观察,计数每个视野中的细胞数。将小室放入培养板时...
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