（1）通过观察菌落特征；
（2）单个菌落再次划线分离。
纯培养的确定除观察其菌落特征外，还要结合显微镜检测个体形态特征后才能确定，有些微生物的纯培养要经过一系列分离与纯化过程和多种特征鉴定才能得到。
扩展资料
纯培养最重要的是在于微生物的生理研究，方法是依靠灭菌和分离，是由巴斯德（L．Pasteur）和柯赫（R．Koch）建立起来的。
在自然界中，有的培养条件很困难，特别是具有密切共生关系的生物及进行寄生性营养的生物；也有一些在理论上不可能进行纯粹培养的生物。
通过分离纯化的方法获得纯培养，它的重要性在于：
（1）通过研究纯培养，人们不仅可以证明特定微生物能引起特定疾病及一些其他方面的特征。
（2）纯培养技术的发明为细菌分类学、遗传学和其他分支学科的发展提供了非常关键的工具。
（3）是微生物学的最基本的研究方法。
（4）对于人们在很多时间内就承认微生物作为一门独立的学科起到了重要的作用。
参考资料来源：百度百科--纯培养
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