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为什么外源基因在酵母中用整合方式表达
如题所述
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推荐答案 2011-06-06
一楼说的对,就是简略了点。
采用整合方式表达就是外源基因随染色体复制进行整合型表达,稳定性高,不会随酵母的增殖而丢失;反之,如果是酵母染色体之外的质粒,就很可能会随着酵母的复制而逐渐丢失了。
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其他回答
第1个回答 2011-05-27
稳定。 质粒容易丢。
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巴斯德毕赤
酵母表达
系统巴斯德毕赤酵母的载体
答:
为了获得高表达稳定性
,外源基因通过同源重组整合到宿主酵母的染色体基因组上,形成整合型表达载体,与质粒型载体相比,整合型载体的拷贝数变化较大,多拷贝表达菌株能产生更多蛋白。获取高产量的方法有两种:一是通过筛选大量转化子自然获得,二是通过多次拷贝插入和交换整合到染色体。尽管摇瓶培养便于筛选,但...
毕赤
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答:
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。整合表达的优点在于保持外源基因稳定性并可产生多拷贝基因。典型的毕赤氏酵母表达载体含有醇氧化酶基因的调控序列
甲醇
酵母表达
系统高效产生的关键因素
答:
首先,
甲醇酵母缺少稳定的质粒,因此,研究人员选择使用整合型质粒作为表达载体
。这种载体利用醇氧化酶(AOX1)基因的启动子PAOX1和转录终止子3′AOX1构建,PAOX1启动子的强大性能使得醇氧化酶的产量能够高达甲醇酵母可溶性蛋白质的30%,从而确保外源蛋白质在其调控下高效表达[2]。其次,为了优化表达效率,...
毕赤
酵母
如何做
表达
?
答:
Pichia.pastoris酵母菌体内无天然质粒,
所以表达载体需与宿主染色体发生同源重组,将外源基因表达框架整合于染色体中以实现外源基因的表达
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巴斯德毕赤
酵母表达
系统的巴斯德毕赤酵母的载体
答:
)为了获得高稳定的外源蛋白表达菌株,巴斯德毕赤
酵母表达
载体连同
外源基因
通过同源重组
整合
至宿主染色体基因组座位上。与自主复制的质粒型表达载体不同,整合型表达载体的拷贝数可以有很大的变化。含多拷贝外源基因的表达菌株合成蛋白的量也较多。多拷贝表达菌株的获得
方式
有两种。一种是利用SDS-PAGE电泳、免疫...
酵母
的转化和克隆
答:
从而激活报告
基因
,如β-半乳糖甘酶。在含有β-半乳糖甘酶底物的平板上,报告基因会使含结合蛋白的阳性克隆变成蓝色。利用性循环的技术手段
在酵母中
制造多点缺失。含报告基因和缺失位点的单倍体细胞通过随机分配和减数分裂重组的
方式
,
整合
成一个细胞。可以通过选择标记,筛选含有缺失的酵母细胞。
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影响外源基因表达的因素
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外源基因是什么
外源基因的表达
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在酵母中克隆了3个基因
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