过柱子的原理与方法

Question

如题所述

Answer 1

1. 原理：过柱子是化学纯化的基本手段之一。柱层析技术利用固定相（通常是硅胶）吸附产物和杂质，通过不同的流动相（淋洗液）进行淋洗。由于各种物质在固定相中的结合力不同，结合力强的物质洗脱速度慢，而结合力弱的物质洗脱速度快，从而实现分离。
2. 方法：首先称量200-300目的硅胶，其质量应为上样量的30-70倍。将硅胶与适量的溶剂（通常为石油醚）混合搅拌成匀浆。然后装填柱子，在柱底放入棉花塞紧，加入约三分之一体积的石油醚，装上蓄液球。打开柱下活塞，将匀浆倒入蓄液球内，随着沉降用石油醚将沾在蓄液球内的硅胶冲入柱中。
3. 压实：继续加入石油醚，并通过双联球或气泵加压，直至流速恒定。
4. 上样：加入适量的洗脱剂，将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面以防止溶液流过快。
5. 过柱和收集：使用梯度洗涤液进行淋洗，并通过检测（如使用专用喷显剂）来监控产品收集。
6. 送谱：收集到的产品经过旋转干燥后，在进行质谱分析前通常需要进行重结晶处理。