细胞提取RNA求助

Question

如题所述

Answer 1

一般都用biog提取法
1. 请自行准备：无水乙醇、PBS及无RNA酶的1.5mL离心管。
2. 取出析出液和洗涤液，按以下操作：
a) 析出液：4.5mL加入25.5mL无水乙醇；9mL加入51mL无水乙醇。
b) 洗涤液：9mL加入21mL无水乙醇；18mL加入42mL无水乙醇。
c) 配制好的析出液如出现沉淀，可在37℃溶解，摇匀后使用。
3. 细胞处理：a) 培养板培养的单层贴壁细胞，弃培养基，PBS清洗一遍，弃PBS；
b) 培养瓶培养的贴壁细胞应先用胰酶消化，处理为细胞悬液， 细胞量在105-106为佳， 1,000 rpm 离心 5分钟，彻底弃去上清，加入100μL PBS振荡至细胞悬浮；
c) 培养的细胞为悬浮细胞，1,000 rpm 离心 5分钟，彻底弃去上清，加入100μL PBS振荡至细胞悬浮。
4. 加入200μL裂解液，20 μL 消化液，充分振荡混匀，56℃水浴10 分钟至细胞完全裂解。
5. 加入500μL析出液，轻轻颠倒混匀，如有半透明悬浮物，不影响RNA的提取与后续实验。
6. 将吸附柱放入收集管内，将上述溶液转入吸附柱内，静置2 分钟，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液。
7. 将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液至吸附柱内，12,000 rpm 4℃离心1 分钟，弃收集管内废液。
8. 将吸附柱放回收集管内，12,000 rpm 4℃离心2 分钟，离去残留的洗涤液。
9. 取出吸附柱，放入新的无RNA酶的1.5 mL 离心管内，加入50-200μL 洗脱液，静置3 分钟，12,000 rpm 4℃ 离心2 分钟，收集RNA溶液。

Answer 2

您好，现在这个行业发展的不错，生物实验技术外包也会跟着发展，比如一些高校或者企业部分实验不想自己内部开展，或者涉及的设备比较昂贵，技术要求高，都会寻求外包。但是现在竞争也比较大，的得看单位这边整体做的怎么样。
其次要看下你选择单位的规模如何，上海这边的，你可以看下基尔顿生物。