SDS-PAGE电泳检测灵敏度

Question

一般对于SDS-PAGE上样量都是说上样多少ul，我想问下，SDS-PAGE能检测到的蛋白质的最少质量是多少，也就是样品中至少要含有多少mg的蛋白质我们才能检测到。

Answer 1

一般认为是 ug 量级。以每条带 能观察到的蛋白质总量为比较对象。
1. 跟你的样品纯度有关。如果是一个纯蛋白，需要上样量就极少，可以到1ug 甚至更少。如果有10条带的话，那就增加总量大概10倍（10种蛋白含量相当的话），使你的目标能看到为止，实践中需要摸索尝试。
2. 跟染色方法有关，银染色比考马斯亮蓝法染色敏感100-1000倍。

Answer 2

那要看你用什么染色，考马斯亮蓝法染色：每条带0.1-1ug，印染色：每条带2-10ng。但是蛋白质浓度太大的话分离效果也不是很好，100ug/ml的蛋白溶液20ul上样，跑出的条带就很好。

Answer 3

微克量级。

Answer 4

微克量级。