线虫注射外源性目的基因时可不可以将目的基因与标记基因（比如GFP）放在同一个质粒上？

Question

我在网上查的资料都说要将目的基因与荧光标记基因共注射，那么为什么不能将目的基因与标记基因放在同一个质粒上用IRES隔开再注射呢？

Answer 1

完全可以放在同一个质粒上，而且确实有人这么干过。不过实践中一般很少直接用IRES隔开，而是两个独立的转录单元，每个转录单元都有独立的启动子和翻译起始位点。这样在构建质粒时相对比较方便。
不过，把两个基因放到一个质粒上去，往往造成这个质粒很大，造成转染质粒不便、转染效率低。