简述醋酸纤维薄膜电泳分离蛋白质的基本原理和操作过程

Question

如题所述

Answer 1

1
电泳图谱不齐或分离不良y}-!:3,
百拇医药
这是电泳分析中最常见的问题，多数是由于血清滴加不均匀或滴加过多，也有因薄膜质量不合要求所致。点样这一步非常关键，一定要按操作步骤进行。首先选择质匀、孔细、染料吸附少的薄膜充分浸透缓冲液至湿度均匀无干白点。然后将滤纸吸去薄膜表面的多余水份，使薄膜含水量饱和均匀，这样才能防止薄膜表面液体含量不均，水份移动而引起标本移位。点样前注意关闭门窗和风扇，因空气流通快可使标本和水份蒸发而影响电泳图形。点样要力求做到均匀迅速，有报道[2]，在实践中把加样器干沾血清，改为沾取标本前先浸入蒸馏水中沾湿用吸水纸吸干后再沾血清，这样加样器内均匀沾取血清的效果较干沾为佳。y}-!:3,
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2
电泳图谱出现条痕y}-!:3,
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问题是由于点样后薄膜过干，或因电泳槽密闭性不良，或电流过大，温度升高，薄膜水份蒸发干燥而造成的。因此薄膜一定要充分浸透后才能点样，并注意检查电泳槽是否盖紧，电泳槽要放在远离光源热源的阴凉之处。在电泳过程中随时观察电压电流的变化，因通电后产生一定的热量，电流会有所增加。控制电压100～110v，电流0.5～0.6ma/cm，电泳时间一般冬长夏

Answer 2

根据蛋白质的等电点和分子量大小不同，每个蛋白质都有自己独有的等电点和分子量。对蛋白质进行分离。