从青铜到王者，科研小白的进阶之路（2）——细胞实验基础操作教程

Question

如题所述

Answer 1

细胞培养是细胞实验的基础，它能提供大量细胞，并支持细胞功能研究和信号通路研究。细胞培养的质量对实验的准确度至关重要。细胞脆弱，需要精心照料，每天观察状态，调整培养体系或进行相应处理。细胞培养基含有营养物质，易受微生物污染，因此应遵循无菌操作原则。

常用试剂包括基础培养基、胎牛血清、双抗和PBS。基础培养基提供细胞生长所需的基础营养和培养环境。胎牛血清提供细胞生长所需的各种营养成分。双抗预防细胞污染。PBS是细胞清洗和试剂配置中最常用的缓冲盐溶液。胰蛋白酶用于贴壁细胞消化和组织细胞分散。

常用仪器包括细胞培养箱、超净工作台/生物安全柜、倒置显微镜、离心机等。细胞培养箱提供细胞生长的环境。超净工作台/生物安全柜提供无尘无菌操作环境。倒置显微镜用于观察细胞生长状态。离心机用于分离细胞。

常用培养器皿包括培养皿、培养瓶和培养板。培养皿是平面圆盘状容器，培养瓶是瓶状容器，培养板是平板状容器。

细胞复苏是将长期储存的细胞解冻的过程。基本原则是快融，避免细胞损伤。操作方法包括预热水浴锅、将细胞冻存管放入水浴锅、转移细胞悬液至离心管、离心、弃去上清液、使用新鲜的完全培养基重悬细胞、接种至培养器皿。

细胞消化及传代是当贴壁细胞生长铺满培养容器后进行的操作。操作方法包括清洗细胞、加入胰蛋白酶、终止消化、离心、弃去上清液、使用新鲜的完全培养基重悬细胞、分装接种至培养器皿。

细胞冻存是将细胞在低温下保存的过程。操作方法包括配置细胞冻存液、选择对数生长期的细胞、消化并离心、弃去上清液、使用细胞冻存液重悬、分装至细胞冻存管、使用程序降温仪或程序降温盒将细胞缓慢降至低温、置于-80℃冰箱或液氮箱中长期保存。

华仁医学提供专业的细胞培养服务，可根据细胞特性调整培养方法，并提供特殊细胞株的定制服务。